کلون سازی ژن پروتئین ماتریکس (M۱) ویروس آنفلوآنزای پرندگان تحت تیپ H۹N۲ در ناقل pTZ۵۷R/T

زمینه و هدفپروتئین M۱ به عنوان یکی از پروتئین های بسیار حفاظت شده در میان زیرگونه های مختلف ویروس های آنفلوآنزا شناخته می شود و این موضوع اهمیت و جایگاه آن را در حوزه ویروس شناسی برجسته می کند. هدف اصلی این پروژه پژوهشی، کلون سازی دقیق و منظم یک بخش خاص از ژنی است که مسئول کد کردن پروتئین M۱ مرتبط با ویروس آنفلوآنزا زیرگونه H۹N۲ می باشد.روش هاپس از تکثیر ویروس آنفلوآنزا در تخم مرغ های جنین دار مرغ، RNA از نمونه های ویروسی جمع آوری شده در طی این فرایند آزمایشی استخراج شد. سپس توالی نوکلئوتیدی اختصاصی مربوط به ژن M۱ با استفاده از تکنیک واکنش زنجیره ای پلیمراز با رونویسی معکوس (RT‑PCR) تکثیر شد. پس از تکثیر توالی، یک فرایند خالص سازی کامل برای اطمینان از یکپارچگی و کیفیت آن انجام شد. توالی خالص سازی شده سپس در وکتور پلاسمیدی ptZ۵۷R/T، که به طور ویژه برای چنین کاربردهایی طراحی شده است، کلون شد. پس از کلون سازی، محصول حاصل با استفاده از زیرگونه Escherichia coli سویه xl۱‑blue که به دلیل کارایی بالا در فرایندهای کلونینگ شناخته می شود، تکثیر و مجددا خالص سازی گردید.نتایجنتایج این مطالعه به وضوح نشان می دهد که زیرگونه E. coli (xl۱‑blue) در کنار سیستم پلاسمیدی ptZ۵۷R/T می تواند به طور موثر برای جداسازی، کلون سازی و تکثیر موفق ژن های مرتبط با ویروس های آنفلوآنزا به کار گرفته شود؛ همچنین ژن هایی که پروتئین M۱ را کد می کنند و به عنوان یک عامل ضروری در پاتوژنز ویروس های influenza A شناخته می شوند.نتیجه گیریاین رویکرد، اطلاعات و پیشرفت های مهمی را در حوزه ژنتیک ویروسی فراهم می کند و در نتیجه، درک ما را از سازوکارهای ژنتیکی کنترل کننده رفتار و پاتولوژی ویروس آنفلوآنزا عمیق تر می سازد.

کلیدواژه ها:

تحت تیپH۹N۲ ، پروتئین M۱ ، پلاسمید ptZ۵۷R/T ، کلون سازی