توسعه و اعتبارسنجی یک روش نوین ارزیابی سریع و سه بعدی انحلال فسفات در باکتری های گرم مثبت اسپوردار

این پژوهش با هدف طراحی و ارزیابی یک محیط کشت جدید  (FKR) همراه با یک بستر سه بعدی نیمه جامد برای غربالگری کمی و کیفی PSB، عمدتا از جنس Bacillus، انجام شد. ۲۹۹ جدایه گرم مثبت، عمدتا Bacillus از ریزوسفر ذرت، روی محیط های جامد FKR و سه محیط استاندارد Pikovskaya (PVK)، NBRIP و (Sperber (SP کشت داده شدند. سپس جدایه ها در لوله های حاوی FKR–BCP نیمه جامد بر اساس شاخص عمق (SD) و حجم انحلال (SV)، الگوهای رشد در گرادیان اکسیژن و  ویژگی های متابولیکی ثانویه بررسی شدند. محیط FKR به تنهایی ۵۵ درصد سویه ها را به عنوان PSB شناسایی کرد، در حالی که میانگین سه محیط استاندارد تنها ۱۹/۳ درصد (۲۰، ۲۰ و ۱۸ درصد) بود (P<۰.۰۵)، که بیانگر افزایش حدود ۲/۹۵ برابری کارایی غربالگری است. سهم نتایج منفی کاذب در محیط های استاندارد حدود ۸۰–۸۲ درصد و در FKR فقط ۴۵ درصد بود. در سامانه سه بعدی، طی ۲۴ ساعت نخست، بیش از ۷۵ درصد سویه های فعال، ناحیه زرد مشخص در ستون نیمه جامد ایجاد کردند، در حالی که در همان بازه، کمتر از ۵ درصد روی پلیت FKR هاله قابل اعتماد داشتند (P<۰.۰۵). سویه های برتر موفق به ایجاد عمق انحلالی بیش از ۴۰ میلی متر شدند. بررسی ها نشان داد که با تغییر رویکرد از ارزیابی دوبعدی (SI) به سه بعدی (SV)، جایگاه حدود ۱۵ درصد از سویه ها تغییر می کند. در مجموع، ۶ سویه (۳/۸ درصد) الگوی انحلال قلیایی، حدود ۷ درصد تولید گاز و حدود ۲ درصد مایع سازی  محیط نیمه جامد را نشان دادند. ترکیب فرمولاسیون FKR با روش سه بعدی نیمه جامد و کمی سازی حجمی (SV)، ابزاری کارآمد برای انتخاب هدفمند سویه های مناسب توسعه کودهای زیستی فسفاته در خاک های آهکی و قلیایی فراهم می کند.

کلیدواژه ها:

باسیلوس ، غربالگری میکروبی ، کود زیستی ، محیط کشت نیمه جامد ، هاله انحلال