اثر عصاره جفت انسان بر تمایز استخوانی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بندناف

زمینه و هدف: سلول­های بنیادی مزانشیمی با دارا بودن قابلیت خودنوسازی و تمایز به بافت­ های مختلف، نقشی کلیدی در پزشکی بازساختی ایفا می­کنند. عصاره جفت انسانی نیز سرشار از فاکتورهای رشد، اسیدآمینه ­ها و سایر ترکیبات زیستی مهم است. مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر عصاره جفت بر تمایز استخوانی سلول ­های بنیادی مزانشیمی به­ منظور دستیابی به روشی درمانی برای ترمیم ضایعات استخوانی طراحی و اجرا شد. روش ها: سلول­ های بنیادی مزانشیمی پس از استخراج از بند ناف و کشت، با استفاده از عصاره جفت به سمت رده استخوانی تمایز داده شدند. سمیت و زنده مانی سلول­ ها با آزمونMTT، میزان پروتئین عصاره به روش بردفورد، و آلودگی های میکوپلاسما، باکتریایی، اندوتوکسین و فلزات سنگین به­ترتیب با روش ­هایPCR، Pour plate،LAL  و ICP ارزیابی شد. هموگلوبین عصاره با روش درابکین اندازه گیری گردید. تمایز استخوانی با رنگآمیزی الیزارین رد و بیان ژن­ های آلکالین فسفاتاز و استئوکلسین با روش Real-time PCR سنجیده شد. همه آزمایش­ ها در سه تکرار انجام و داده­ ها با استفاده از ANOVA و نرمافزارهای LinRegPCR و REST-RGXL تحلیل شدند (۰/۰۵>P). یافته ها: عصاره جفت فاقد سمیت بوده و باعث تسریع روند استخوانیسازی سلول­ ها گردید. در روز ۱۴ کشت، میزان فعالیت آلکالین فسفاتاز و رسوبات کلسیمی در گروه­ های تیمار شده با عصاره به­ طور معناداری افزایش یافت. بیان ژن استئوکلسین در بالاترین غلظت عصاره (۱ میلی­ لیتر) نسبت به گروه کنترل تفاوت معناداری نشان داد (۰/۰۵>P). آزمون­ های کیفی عصاره نیز عاری از هرگونه آلودگی و هموگلوبین را تایید کردند. نتیجه گیری: عصاره جفت با دارا بودن فاکتورهای رشد، ویتامین­ ها و مواد معدنی، روند تمایز استخوانی سلول­ های بنیادی مزانشیمی را به ­طور معناداری تسریع می­کند و می­ تواند به ­عنوان یک عامل موثر در پزشکی بازساختی استخوان مطرح باشد.

کلیدواژه ها:

Placenta extract ، Mesenchymal stem cells ، Differentiation ، Umbilical cord ، Bone ، عصاره جفت ، سلول­های بنیادی مزانشیمی ، تمایز ، بند ناف ، استخوان