تحویل هدفمند و همزمان پاکلی تاکسل و siRNA به کمک نانوذرات کوپلیمری PLA–Chitosan–PEG–Folic acid جهت درمان سلول های سرطانی پستان MCF-۷

مقدمه: فناوری نانو از طریق طراحی سیستم های دارورسانی هوشمند، چالش دارورسانی هدفمند و اسیدهای نوکلئیک به سلول های سرطانی را برطرف می کند. این رویکرد، دقت و کارایی بهبود یافته در دارورسانی عوامل درمانی را ممکن می سازد. این مطالعه بر طراحی و ارزیابی یک نانوحامل چندمنظوره مبتنی بر PLA/Chitosan/PEG عامل دار شده با اسید فولیک (FA) با قابلیت هدف گیری تومور و دارورسانی هم افزایی پاکلی­تاکسل (PTX) و siRNA به سلول های سرطان سینه (MCF-۷) تمرکز دارد که هدف آن افزایش جذب انتخابی و کارایی درمانی در مقایسه با سیستم های دارورسانی مرسوم است. روش بررسی: سنتز نانوذرات (FA/PLA/Chitosan/PEG) PCPF به کمک روش پیونددهی شیمیایی و فرآیند حل-در-حلال انجام شد. سپس دارو PTX و siRNA برعلیه ژن  Survivinبا روش انتشار حلال همراه با امولسیون چندمرحله ای در نانوذرات PCPF بارگذاری شدند. ویژگی­های فیزیکوشیمیایی و مورفولوژی نانوذرات و نانوکپسول ­های سنتز شده از طریق ۱H-NMR، FTIR و DLS بررسی شد. پس از بررسی تاثیر­pH های مختلف (۵ و ۴/۷) بر رهایش محموله ها، سمیت سلولی نانوکپسول ها با آزمون MTT و آپوپتوز با روش Annexin V/PI در رده های MCF-۷ و MCF-۱۰A ارزیابی شد. آنالیز آماری داده ها با استفاده از ANOVA یک طرفه و آزمون دانکن (SPSS ۲۲، سطح معنی داری ۵ درصد) انجام شد. یافته ­ها: نتایج آنالیز ۱H-NMR و FTIR تشکیل موفقیت آمیز نانوذرات PCPF را تایید کرد. طبق نتایج حاصل از DLS مشخص شد که اندازه نانوذرات از ۶±۱۶۲ نانومتر برای  PCPFتا ۱۱±۲۵۶ نانومتر برای PCPF/siRNA/PTX  متغیر بود. هم­چنین مشخص شد که بارگذاری PTX و siRNA اندازه و PDI نانوذرات را افزایش داد و پتانسیل زتا عمدتا منفی مشاهده شد. مطالعات رهایش، نشان داد رهایش PTX و siRNA در pH  اسیدی (۵) به طور قابل توجهی بیشتر از pH خنثی (۴/۷) بود. آزمون ­MTT، سمیت انتخابی نانوذرات حاوی PTX و siRNA را علیه سلول های سرطانیMCF-۷ و کاهش عوارض بر سلول های سالم MCF-۱۰A در مقایسه با داروی آزاد، را اثبات کرد. هم­چنین نتایج آپوپتوز سلولی نشان داد که بیشترین میزان پیش و پس آپوپتوز سلولی (به ترتیب ۳۲/۲۵ و ۸۵/۱۹ درصد) برای سلول های MCF-۷ مربوط به نانوکپسول های PCPF/siRNA/PTX بود، در حالی که بیشترین درصد سلول ­های واقع در مرحله نکروز (۵۹/۳۰ درصد) مربوط به PTX آزاد بود. نتیجه ­گیری: به طور کلی، نانوذرات PCPF مبتنی بر PLA-PEG و هدفمندشده با فولیک اسید، با رهش کنترل شده وابسته به pH و زیست سازگاری مطلوب، سمیت انتخابی و القای غالب آپوپتوز را نشان داده و از طریق انتقال همزمان PTX/siRNA، به طور معنی داری موجب افزایش اثر سینرژیستی درمانی در سلول های سرطانی شدند.

کلیدواژه ها:

Apoptosis ، Controlled drug/gene release ، MCF-۷ ، Paclitaxel ، Polymeric nanoparticles ، and Simultaneous drug/gene delivery. ، آپوپتوز سلولی ، پاکلی تاکسل ، انتقال همزمان دارو و ژن به سلول ، رهایش کنترل شده دارو و ژن ، نانوذرات پلیمری و MCF-۷