بررسی اثر متقابل زمان و غلظت مواد محافظت کننده سرما بر انجماد شیشه ای تخمک های نابالغ گاوی با روش کرایوتاپ

این مطالعه با هدف ارزیابی برهم کنش زمان و غلظت مواد محافظت کننده سرما (CPA) در انجماد شیشه ای تخمک های نابالغ گاوی انجام شد. در این پژوهش، ۲۱۲ مجموعه تخمک-سلول کومولوس (COC) نابالغ با کیفیت مطلوب در قالب پنج پروتکل متفاوت انجماد شیشه ای با روش کرایوتاپ مورد بررسی قرار گرفتند. متغیرهای مستقل شامل غلظت های مختلف اتیلن گلیکول (EG) و دی متیل سولفوکساید (DMSO) در محیط های تعادل (EM) و انجماد (VM) به همراه زمان های مواجهه متفاوت (۳۰ ثانیه تا ۳ دقیقه) بود. نتایج ارزیابی مورفولوژیک نشان داد که پروتکل اول (۱ دقیقه EM با ۱۰درصد EG/DMSO و ۳۰ ثانیه VM با ۲۰درصد EG/DMSO ) بیشترین درصد تخمک های سالم (۲۴/۴ ± ۳۴/۸۳) را به همراه داشت، اما هیچ یک از تخمک ها در درجهC (تخمک زنده و کمتر از نیمی از سلول های کومولوس مرده) قرار نگرفتند. در مقابل، پروتکل چهارم (۲ دقیقه EM با ۱۰درصد EG/DMSO و ۴۵ ثانیه VM با ۲۰درصد EG/DMSO) بالاترین درصد درجهC (۰۷/۰ ± ۱۸/۴۴) را نشان داد. تحلیل رگرسیون لجستیک نیز تایید کرد که زمان ۳۰ ثانیه در VM شانس قرارگیری در درجهB (تخمک زنده ولی بیش از نیمی از سلول های کومولوس مرده) را افزایش می دهد (۰۰۱/۰P<)، در حالی که افزایش زمان EM به ۲ دقیقه شانس قرارگیری در درجهC را کاهش می دهد (۰۰۱/۰P<). نتایج این مطالعه نشان می دهد که موفقیت در انجماد شیشه ای تخمک های نابالغ گاوی وابسته به تعادل بهینه بین غلظت و زمان مواجهه با ضدیخ هاست و پروتکل چهارم به عنوان روش بهینه برای حفظ هم زمان مورفولوژی و کیفیت زنده مانی معرفی می شود.

کلیدواژه ها:

انجماد شیشه ای ، تخمک نابالغ گاوی ، مواد محافظت کننده سرما ، زنده مانی