به کارگیری یک پپتید سنتتیک دایمری RhD برای ایمن سازی در خرگوش و مقایسه آن با آنتی ژن کامل به دست آمده از غشای گلبول قرمز انسان

چکیده سابقه و هدف  پروتئین هایRh ، از اهمیت بالایی در انتقال خون برخوردار می باشند. در میان آنتی ژن های گروه خونیRh ، آنتی ژن D بسیار ایمونوژن است و تشخیص این آنتی ژن به لحاظ بالینی اهمیت دارد. هدف این مطالعه، ایجاد آنتی بادی های اختصاصی ضد آنتی ژن D در حیوان خرگوش با به کارگیری آنتی ژن کامل و دایمری از یک پپتید سنتتیک ویژه آنتی ژن D بود. در نهایت، بررسی کارآیی آنتی بادی های حاصل در آگلوتیناسیون گلبول های قرمز انسانی مورد مطالعه قرار گرفت. مواد و روش ها در این مطالعه تجربی، آنتی بادی ضد RhD  در حیوانات خرگوش ایجاد شد. خرگوش های ۱ و ۲، آنتی ژن کامل RhD را دریافت نمودند که از غشای گلبول های قرمز به روش کروماتوگرافی تمایلی خالص گردیده بود. به موازات، خرگوش ۳ با یک پپتید اختصاصی که با روش O-PDM  دایمر شده بود ایمونیزه شد. مولکول های IgG از آنتی سرم های خرگوشی خالص شدند. ویژگی آنتی ژن خالص شده RhD و هم چنین آنتی سرم های ایجاد شده در خرگوش ها با روش ELISA ارزیابی شد. به علاوه عملکرد آنتی سرم ها از طریق آگلوتیناسیون گلبول های قرمز انسانی مورد مطالعه قرار گرفت. یافته ها ویژگی آنتی ژن RhD خالص شده با به کارگیری یک آنتی بادی تجاری به وسیله روش ELISA نشان داده شد. تشکیل آنتی بادی های ضد RhD در سرم حیوانات خرگوش پس از اتمام مراحل تزریق، با به کارگیری روش ELISA تایید گردید. آنتی بادی های پلی کلونال به دست آمده از حیوانات ایمیون، توانایی آگلوتیناسیون گلبول های قرمز O+ را در روش دو مرحله ای و حضور یک آنتی بادی ثانویه دارا بودند (۳=n). در این رابطه، آنتی سرم های مربوط به تزریق آنتی ژن کامل و پپتید دایمر نتایج مشابهی نشان دادند. آنتی بادی های به دست آمده تنها قادر به آگلوتیناسیون گلبول های قرمز +O از طریق روش دو مرحله ای بودند. استفاده از پپتید سنتتیک مرتبط با انتهای آمینو آنتی ژن RhD، در شکل دایمر آن ویژگی ایمونولوژیک مشابهی را در مقایسه با آنتی ژن کامل نشان داد. نتیجه گیری             بر اساس یافته های این مطالعه، آنتی سرم حاصل از تزریق پپتید سنتتیک دایمری، از نظر قدرت ایمنی زایی، نتایج مشابهی با آنتی ژن کامل RhD در تست آگلوتیناسیون گلبول های قرمز واجد RhD نشان داد. بنابراین، به نظر می رسد برای ایمن سازی موثر با یک پپتید، می توان از فرم دایمری مناسب آن پپتید به عنوان جایگزینی برای پپتید کونژوگه و پروتئین حامل استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

Red Blood Cells ، Rh Factor ، Peptides ، Immunization ، Rabbits ، گلبول های قرمز ، فاکتور Rh ، پپتیدها ، ایمونیزاسیون ، خرگوش ها