مقایسه القای پاسخ ایمنی در سلول های تک هسته ای خون محیطی توسط گلبول های قرمز واجد آنتی ژن RhD و عصاره غشایی حاصل از آن سلول ها در محیط کشت سلولی

سابقه و هدف  سیستم گروه خونی Rh یکی از مهم ترین و پیچیده ترین سیستم های آنتی ژنی پس از ABO است. تولید آنتی بادی های اختصاصی ضد RhD برای کاربردهای تشخیصی و درمانی اهمیت بالایی دارد. هدف از این مطالعه، ارزیابی پاسخ ایمنی ایجاد شده در سلول های تک هسته ای خون محیطی به وسیله گلبول های قرمز واجد آنتی ژن RhD و عصاره غشایی آن ها در محیط کشت سلولی بود.   مواد و روش ها در این مطالعه تجربی، سلول های تک هسته ای خون محیطی (PBMCs) از ۲ کیسه خون کامل با گروه خونی O منفی به روش گرادیان چگالی و با استفاده از معرف فایکول جداسازی شدند. سپس به منظورحذف سلول های مهارکننده ایمنی، سوسپانسیون سلولی حاصله به مدت ۴۰ دقیقه با لوسین متیل استر (۵/۲ میلی مولار) مواجه شده و پس از شستشو، در معرض گلبول های قرمز واجد آنتی ژن RhD و عصاره غشایی آن ها در محیط کشت قرار گرفته و توانایی آن ها در القای تولید آنتی بادی توتال و اختصاصی با استفاده از آزمون ELISA ارزیابی شد. با توجه به محدود بودن تعداد تکرارهای آزمایش، از روش ویلکاکسون به عنوان روش آماری غیر پارامتریک استفاده شد.  یافته ها پس از ایمن سازی سلول های PBMCs با گلبول قرمز +O و عصاره غشایی آن ها، میزان تولید آنتی بادی با روش کمی ELISA تعیین شد. میانگین غلظت توتال آنتی بادی در مواجهه با عصاره غشایی ۵۱/۱۹ ± ۱۵۹/۳ نانوگرم در میلی لیتر (۴ =n) و در مواجهه با گلبول قرمز کامل ۳۸/۹ ± ۱۳۶/۵ نانوگرم در میلی لیتر (۲ =n) ارزیابی شد. هم چنین، غلظت آنتی بادی اختصاصی علیه RhD در حضور عصاره غشایی ۱۰/۵۸ ± ۳۸/۱۷ و در حضور گلبول قرمز کامل ۲/۹۵ ± ۱۸/۷۵ نانوگرم در میلی لیتر اندازه گیری شد. بر اساس داده ها، هر دو فرم آنتی ژن قادر به القای پاسخ ایمنی هستند. آزمون ویلکاکسون نشان داد که تفاوت بین دو گروه از آنتی ژن ها در هر دو نوع  ارزیابی آنتی بادی کل و آنتی بادی های اختصاصی RhD معنا دار نمی باشد.  نتیجه گیری             بر اساس یافته های مطالعه، به نظر می رسد که  آنتی ژن غشایی گلبول قرمز نسبت به سلول کامل  بهتر بتواند در القای پاسخ ایمنی علیه آنتی ژن RhD در محیط کشت موثر باشد، ولی تفاوت آماری این دو معنادار نبوده و بر این اساس، استفاده از عصاره غشایی گلبول قرمز و سلول کامل هر دو می توانند در تولید آنتی بادی های اختصاصی علیه آنتی ژن RhD در شرایط کشت سلولی مد نظر قرار گیرند.

کلیدواژه ها:

In vitro ، Immunizaltion ، Antibody Response ، Red Blood Cells ، محیط کشت ، ایمنی زایی ، پاسخ آنتی بادی ، سلول های قرمز خون