طراحی و ساخت سازه ژنی برای تولید ماهی گورخری تراریخت Tg(pdx۱:GFP) به عنوان مدلی برای مطالعات دارویی در دیابت
سال انتشار: 1404
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 29
فایل این مقاله در 24 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JAPB-13-2_004
تاریخ نمایه سازی: 8 دی 1404
چکیده مقاله:
ژن pdx۱ که با نام فاکتور انسولین ۱ هم شناخته میشود کلید اصلی رشد و تکوین پانکراس و همچنین بلوغ سلولهای بتا و بقای آنها است. با هدف قرار دادن این ژن، مدلهای تراریخت مختلفی در سلولهای بنیادی و همچنین مدلهای جانوری تولید شده اند که در زمینه پژوهش های بیماری دیابت کاربرد دارند. در این پژوهش، هدف ساخت پلاسمید ژنی بر پایه Tol۲ با استفاده از روش کلون سازی مرسوم است که برای ایجاد مدل تراریخت ماهی گورخری Tg(pdx۱:GFP) قابل استفاده است. برای نشاندار کردن این ژن نیاز است بخشی از توالی پروموتر آن در بالادست ژن گزارشگر قرار گیرد. از آنجایی که ناحیه تنظیمی ژن pdx۱ تعریف نشده است، دو جفت آغازگر را برای تقویت توالی ʹ۵ طرفین ۲۵۰۰ و ۶۶۰۰ جفت باز در بالادست کدون شروع ATG در ژن pdx۱ ماهی گورخری طراحی شد که به انتهای ʹ۵ وʹ۳ هر کدام از این آغازگرها توالی آنزیمهای محدود کننده انتخاب شدهای (SalI و Sph۱) قرار داده شد. بدین منظور بعد از طراحی آغازگرهای مناسب برای دو طول متفاوت از توالی پروموتور ژن pdx۱ بیان شونده در مسیر سلول های بتا، این قطعات تکثیر و با استفاده از روش کلون سازی مرسوم، بعد از هضم آنزیمی و با استفاده از واکنش اتصال، در پلاسمید Tol۲ حاوی ژن گزارشگر فلورسنت سبز وارد شدند. تایید صحت فرایند کلون سازی با استفاده از کلونی PCR، هضم آنزیمی و توالی یابی انجام شد. نتایج نشان داد که فرایند کلون سازی مرسوم علاوه بر هزینه کم برای کلون کردن قطعات با اندازههای مختلف دارای کارایی مناسب است.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
مهسا مویدی
کارشناس ارشد ژنتیک، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، کرج، ایران
محمد رضائی
دکتری ژنتیک آبزیان، گروه سلول های بنیادی و زیست شناسی تکوینی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی، پژوهشگاه رویان، سازمان جهاد دانشگاهی، تهران، ایران
عبدالحمید انگجی
دانشیار گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، کرج، ایران
یاسر تهمتنی
دانشیار گروه سلول های بنیادی و زیست شناسی تکوینی، پژوهشکده زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی، پژوهشگاه رویان، سازمان جهاد دانشگاهی، تهران، ایران
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
