کلونینگ و توالی یابی ژن کامل راپتری دو (ROP۲) از توکسوپلاسماگوندی

توکسو پلاسما گوندی یک تک یاخته داخل سلولی می باشد که باعث بیماری توکسو پلاسموزیس در انسان و حیوانات می شود. بیمارانی که نقص سیستم ایمنی دارند، عفونت مزمن این بیماری می تواند دوباره فعال شده و باعث آنسفالیت شود که اغلب کشنده می باشد. پروتئین راپتری ۲ توکسو پلاسما گوندی(ROP۲) یکی از میانجی های مهم در آمیزش ارگانل-PVM می باشد. پروتئین ROP۲ در بدن انسان توسط کلون Tcell شناسایی می شود . همچنین ROP۲ برای Bcell دارای اپی توپ می باشد. همه این ویژگی های ROP۲ باعث شده که از این پروتئین به عنوان کاندید برای تهیه واکسن های نوترکیبی و کوکتلی علیه توکسوپلاسموزیس استفاده شود. بحث و نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان داد که با موفقیت ژن کامل ROP۲ در داخل پلاسمید pTZ۵۷R/T کلون شده است و از این پلاسمید نوترکیب (pT-ROP۲) می توان برای ساختن DNA واکسن بر علیه توکسوپلاسموزیس استفاده کرد. یافته ها: این پژوهش نشان داد که ژن کامل ROP۲ در داخل پلاسمید pTZ۵۷R/T کلون شده و پلاسمید نوترکیب (pT-ROP۲)را تشکیل می دهد. توالی یابی ژن کامل ROP۲ که در داخل وکتور pTZ۵۷R/T کلون شده است، نشان دادکه توالی ژن کامل ROP۲ از سوش بسیار بیماریزای توکسوپلاسما گوندی (معروف به سوش RH)شباهت زیاد ۹۸ درصدی با سوش RH موجود در بانک ژنی دارد. (Gen bank Accession No.Z۳۶۹۰۶.۱). مواد و روش ها: در این مقاله کلونینگ و توالی یابی ژن کد کننده پروتئین کامل ROP۲ از توکسوپلاسما گوندی توصیف خواهد شد. در این تحقیق ، ابتدا DNA ژنومی توکسوپلاسما گوندی استخراج شده و از آن برای تکثیر ژن کامل ROP۲ با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده استفاده گردید.سپس محصول PCR در داخل وکتور pTZ۵۷R/T کلون شده و متعاقبا پلاسمید کلون شده در باکتری E.Coli ترانس فورم شده و به دنبال آن پلاسمید حاوی ژن کامل ROP۲(pT-ROP۲)که توسط هضم آنزیمی و PCR تایید شده بود، از باکتریهای ترانس فورم شده، استخراج گردید و از آن برای توالی یابی ژن کامل ROP۲ استفاده گردید

کلیدواژه ها:

Polycystic ovarian syndrome ، Abnormal glucose tolerance ، Obesity ، کلونینگ ، توالی یابی ، توکسوپلاسما گوندی ، ژن کامل ROP۲