اثر مدل سازی هایTaqMan Real-time PCR برای اصالت سنجی برگرهای مرغ

زمینه مطالعه: گزارش هایی حاکی از تقلب استفاده از کنجاله سویا به عنوان جایگزین بخشی از مرغ در برگرهای مرغ وجود دارد، بنابراین اصالت سنجی برگرهای مرغ از اهمیت بالایی برخوردار است.هدف: با توجه به کارآمد بودن روش های PCR در شناسایی گونه در فراورده های گوشتی، ۲ مدل و اعتبارسنجی با تکنیک TaqMan Real-time PCR  برای اصالت سنجی برگر مرغ به کار گرفته شد.روش‎کار: مناطق Cytb و S rRNA۱۸ به ترتیب برای شناسایی مرغ و کنترل داخلی استفاده شدند. مخلوط های مرجع مرغ/کنجاله سویا با درصد مرغ ۰۱/۰، ۱/۰، ۱، ۱۰ و ۱۰۰ (وزنی/وزنی) برای رسم منحنی استاندارد نسبی و رقت سریالی DNA استخراج شده از نمونه های مرغ خالص برای رسم منحنی مطلق به کار گرفته شدند. همچنین مرحله اعتبارسنجی پس از تایید منحنی استاندارد دارای شاخصه های قابل قبول، با استفاده از نمونه های مدل (مخلوط­های مدل ۶۰، ۳۰، ۱۰ و ۵ درصد مرغ سویا (وزنی / وزنی) و برگر ۷۵ درصد گوشت مرغ) انجام شد.نتایج: منحنی­های ترسیم شده برای هر دو مدل با استفاده از مخلوط­های مرجع دارای شاخصه های قابل قبول مطابق با معیار های تعیین شده برای ارزیابی های qPCR بودند، به طوری که  R۲برای ۲ منحنی به ترتیب ۹۹۸۶/۰ و ۹۹۹۳/۰، شیب ۲۶۴۷/۳- و ۵۳۳۳/۳- و درصد کارایی تکثیر ۴۴/۱۰۲ و ۸۸/۹۱ تعیین شدند. همچنین در مرحله اعتبارسنجی، استفاده از نمونه های مدل و ارزیابی آن ها با تکنیک تعریف شده  TaqMan-qPCR نشان داد که مقادیر درصد RSD (پارامتر دقت) قابل قبولی برای همه نمونه ها با استفاده از هر دو مدل (<۲۵ درصد) حاصل شد، اما مقادیر درصد Bias (پارامتر صحت) برای نمونه های مدل ارزیابی شده با مدل مطلق در محدوده قابل پذیرش (۲۵ درصد±) نبودند.نتیجه­گیری نهایی: مدل نسبی با دقت و صحت قابل قبولی و با حساسیت تشخیصی ۱/۰ درصد می تواند گوشت مرغ را در برگرهای مرغ شناسایی کند و برای اصالت سنجی برگرهای مرغ و جلوگیری از برچسب گذاری اشتباه در سطح عرضه به کار گرفته شود.

کلیدواژه ها:

اصالت سنجی ، برگر ، شناسایی گونه ، محصولات گوشتی ، PCR