توسعه و بهینه سازی مرحله به مرحله روش کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا با تکنیک آماده سازی نمونه رقیق و تزریق مستقیم برای اندازه گیری بنیدیپین هیدروکلرید در نمونه های دارویی و بیولوژیکی

در این کار پژوهشی از روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا با آشکارساز مرئی- فرابنفش (HPLC-UV-Vis)  برای اندازه گیری داروی بنیدیپین، در نمونه های دارویی، اورین انسان و نمونه ی سرم استفاده شده است. روش پیشنهادی پس از بهینه سازی شرایط مختلف کروماتوگرافی و سایر پارامترهای آزمایشی، بر اساس دستورالعمل های کنفرانس بین المللی هماهنگ سازی اعتبارسنجی شد.نتایج مطلوب با ستون ACE ۵µm C۱۸ (۱۵۰ میلی متر × ۶۰/۴ میلی متر؛ ۰۰/۵ میکرومتر) در ۴۵ درجه سانتی گراد به دست آمد. فاز متحرک شامل استونیتریل: بافر (۴۰ میلی مولار استات آمونیوم) با غلظت ۷۵: ۲۵ درصد حجمی-حجمی  (V/V%)تنظیم شده در pH برابر ۷۵/۶ و با سرعت جریان ۰۰/۱ میلی لیتر در دقیقه است. طول موج ۲۳۸ نانومتر انتخاب شد. روش به طور کامل اعتبارسنجی شد و پارامترهای اعتبارسنجی عبارت بودند از: محدوده خطی ۰۰/۲۵-۱۵/۰میلی گرم بر لیتر و ضریب همبستگی ۹۹۹/۰ برای همه نمونه ها. مقادیر حد تشخیص داروی بنیدیپین هیدروکلرید به ترتیب ۴۶/۰، ۲۰/۱ و ۳۰/۸ میکرو گرم بر لیتر در استونیتریل، سرم و اورین انسان یافت شد. مقادیر حد کمی سازی در استونیتریل، سرم و اورین انسان به ترتیب ۵۰/۱، ۸۰/۳ و ۰۰/۲۷ میکرو گرم بر لیتر بود. دقت بین روز و درون روز، که با انحراف استاندارد نسبی (%RSD) نشان داده شده است، به ترتیب ۱۳/۰ و ۲۷/۰ درصد در محلول بافر/استونیتریل بدست آمد. میانگین مقادیر بازیابی نسبی بین ۰۰/۹۷٪ و ۰۰/۱۰۵٪ بود. بنابراین، روش پیشنهادی سریع و دقیق است و می تواند با موفقیت در مطالعات فارماکوکینتیک و عملکرد بالینی معمول استفاده شود

کلیدواژه ها:

کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا ، بنیدیپین هیدروکلرید ، نمونه سرم خون ، نمونه ادرار انسان