بهینه سازی روش های استخراج DNA از گوشت و فرآورده های گوشتی
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: بیست و یکمین کنگره ملی علوم و صنایع غذایی ایران
- کد COI اختصاصی: NCFOODI21_099
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 1584
نویسندگان
دانشجوی کارشناسی ارشد مهندسی علوم و صنایع غذایی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
استادیار گروه مهندسی علوم و صنایع غذایی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
استادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد پرند، تهران، ایران
استادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران مرکزی، تهران، ایران
چکیده
هدف: امروزه روش های مولکولی مخصوصاً واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) در بررسی محصولات گوشتی از اهمیت روز افزونی برخوردار است، استخراج DNA اولین گام در این بررسی ها است. نقطه شروع بسیاری از روشهای بیولوژی مولکولی، ضرورت جداسازی DNA با کیفیت عالی است. معمولاً کیفیت DNA با عواملی از قبیل عدم آلودگی ناشی از RNA، پروتئین، لیپید و سایر ساختارهائی که برای آنزیمهای برشی و پلی مرازها مزاحمت ایجاد می کنند سنجیده می شود. استخراج DNA مخصوصاً از فرآورده های گوشتی حرارت دیده بخاطر اثرات تخریبی حرارت بر روی DNA، خیلی مشکل است. مواد و روش ها: در این مطالعه، برای استخراج DNA 10 برند سوسیس از سه پروتکل مختلف کیت استخراج GF-1، روش TNES و CTAB بر طبق روش Sambrook و همکاران 1989 با اعمال تغییراتی استفاده شد. بر روی DNA های استخراج شده ارزیابی کمی (نانودراپ) و کیفی (ژل آگارز) انجام شد. واکنش PCR بر روی تمام نمونه ها با پرایمر یونیورسال ژن 12SrRNA انجام شد. نتایج و بحث: نتایج آزمایش کیفی و کمی نشان داد که استفاده از کیت استخراج GF-1 برای استخراج DNA از سوسیس مناسب نبود. نتایج آزمون کیفی در مورد استخراج با دو بافر استخراج TNES و CTAB نشان داد که روش CTAB مناسب تر از روش TNES بود ولی نتایج آزمایش کمی (نانودراپ) بر روی DNA استخراج شده در دو روش بیانگر این بود که میزان جذب محلول DNA در محدوده 1/7-2 قرار داشت. که نشان دهنده کمیت بالای DNA استخراجی است. تمامی DNA های استخراجی به وسیله واکنش PCR تکثیر شد. نتیجه گیری کلی: به نظر می آید روش استخراج DNA با بافر CTAB روش مناسب تری نسبت به دو روش دیگر باشد. این روش می تواند برای استخراج DNA از محصولات گوشتی حرارت دیده به صورت روتین در آزمایشات استفاده شود.کلیدواژه ها
بهینه سازی استخراج DNA، فرآورده های گوشتی، TNES, CTABمقالات مرتبط جدید
- تاثیر عصاره آبی و الکلی میوه سماق بر روی تریکوموناس واژینالیس و کاندیدا آلبیکنس در شرایط برون تنی
- بررسی خواص فیکوسیانین بر مهار رشد سلول و مرگ سلولی در سرطان پروستات (رده سلولی LNCAP)
- ارزیابی آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتید بر القای آپاپتوز بر سل لاین MCF
- فراوانی ژن های انتروتوکسین sea ، seb و sec استافیلوکوکوس اورئوس در ناقلین سالم استان مازندران
- بررسی اثر اسانس بنه و عصاره پنیرک به عنوان نگهدارنده طبیعی بر خصوصیاتضد میکروبی و کیفی سس مایونز
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.