بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در اشرشیا کلی سویه BL21

سابقه و هدف: آلبومین سرم انسانی از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد. این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها و متابولیت ها در بدن می باشد و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. از آنجایی که تهیه آن از پلاسمای خون افراد اهداکننده بسیار پرهزینه و همراه با آلودگی است تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری است. مواد و روشها: برای تولید آلبومین انسانی نوترکیب از باکتری اشرشیا کلی سویه( BL21(DE3، به عنوان میزبان استفاده شد. پس از سنتز ژن HSA و ا نتقال آن به وکتور بیانی pET22b، پلاسمید نوترکیب pET22b/HSA به سلول پذیرای (BL21(DE3 انتقال یافت و کلونی های حاوی وکتور بیانی نوترکیب کشت شبانه داده شدند. تولید پروتئین آلبومین با استفاده از روش وسترن بلات تأئید گردید و تخلیص پروتئین توسط کروماتوگرافی تمایلی انجام شد. نتیجه: در این مطالعه به منظور افزایش تولید آلبومین انسانی از میان سه زمان انکویاسیون 3 و 5 و 24 ساعت سلول های BL21 حاوی پلاسمید ن وترکیب pET22b/HSA، مدت زمان 24 ساعت بیشترین بیان را در بر داشت و تولید این پروتئین در فضای پری پلاسم باکتری باعث ایجاد Folding مناسب آن بود. نتایج نشان می دهد که آلبومین انسانی بصورت نوترکیب و در میزبان باکتریایی می تواند تولید شود.

کلیدواژه ها:

آلبومین سرم انسانی ، ( Folding ، pET22b ، BL21(DE3