تولید ایمونوگلوبین زرده تخم مرغ (IgY) علیه پروتئین کایمر نوترکیب دربردارنده ایمونوژن های باکتری سالمونال تیفی موریوم

سالمونال تیفی موریوم یکی از پاتوژن های مهم انسانی و دامی است که باعث بروز بیماری های گوارشی و سیستمیک می باشد. این باکتری گرم منفی از خانواده انتروباکتریاسه بوده و به دلیل توانایی در آلوده کردن گستره وسیعی از میزبان ها، از اهمیت ویژه ای برخوردار است. استفاده از IgY (ایمونوگلوبین زرده تخم مرغ) در برابر سالمونال تیفی موریوم یکی از روش های نوین و موثر برای کنترل و درمان عفونت های ناشی از این باکتری است. پالسمید نوترکیب pET۲۸a واجد کاست ژنی دربردارنده نواحی ایمونوژن های OmpA، OmpC، OmpF و FliC (FOAFC) در E.coli BL۲۱ (D۳) تراریخت گردید. بیان پروتئین نوترکیب با غلظت ۱ میلی مولار IPTG القا گردید. پروتئین نوترکیب با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA تخلیص شد. ایمن سازی مرغ های نژاد لگهورن با ۲۰۰ میکروگرم پروتئین نوترکیب FOAFC به روش تزریق زیرجلدی صورت گرفت. ایمونوگلوبین زرده تخم مرغ به روش ترسیب با پلی اتیلن گلیکول (PEG) استخراج و با روش الیزا، تیتر آنتی بادی در سرم و زرده تخم مرغ ارزیابی گردید. پروتئین نوترکیب با وزن مولکولی ۵۸.۷ کیلودالتون و بازده بیانی ۱۰ میلی گرم بر لیتر محیط کشت تخلیص گردید. غلظت آنتی بادی تخلیص شده از زرده تخم مرغ ۱۰ میلی گرم بود. تیتر آنتی بادی در سرم علیه پروتئین نوترکیب FOAFC پس از تزریق سوم ۱۲۸۰۰/۱ بود. در روش الیزا حداقل ۳۱.۲۵ نانوگرم از آنتی بادی با پروتئین نوترکیب FOAFC واکنش نشان داد. ایمونوگلوبین زرده تخم مرغ (IgY) که از زرده تخم مرغ مرغ های ایمن شده استخراج می شود، به عنوان یک آنتی بادی اختصاصی، می تواند در پیشگیری و درمان عفونت های سالمونلا کاربرد داشته باشد.

کلیدواژه ها:

سالمونال تیفی موریوم ، ایمونوگلوبین زرده تخم مرغ(IgY) ، پروتئین نوترکیب ، پیشگیری