شناسایی چندشکلی ژن PPP۲CA مرتبط با ذخیره چربی در گوسفندان نژاد رومانوف , قزل و ماکویی

در مطالعه حاضر که برای شناسایی چندشکلی در نواحی اگزون ۱ ژن PPP۲CA در جمعیت گوسفندان نژادماکویی، قزل و رومانوف انجام گرفت از تعداد ۵۰ راس گوسفندنژاد ماکویی، ۵۰ راس گوسفندان نژاد قزل و ۵۰ راسگوسفندان نژاد رومانوف خونگیری از ورید وداجی انجام شد. استخراج DNA به روش بهینه یافته نمکی صورت گرفتهو کیفیت آن برروی ژل آگارز یک درصد و کمیت آن توسط دستگاه نانودرآپ مورد ارزیابی قرار گرفت. واکنشزنجیره ای پلیمراز برای تکثیر قطعه ۲۴۳ جفت بازی ژن PP۲CA انجام گرفت. و کیفیت و درستی تکثیر ناحیه موردنظر برروی ژل آگارز یک و نیم درصد به همراه نشانگرمولکولی (لدر) مشاهده شد. سپس جهت شناسایی پلی مورفیسم(چندشکلی) در نمونه ها روش SSCP (تفاوت در فرم فضایی رشته های منفرد) به کار گرفته شد. الکتروفورز عمودینمونه ها بر روی ژل آکریل آمید ۱۲ درصد به مدت ۸ ساعت با ولتاژ ۳۰۰ ولت در دمای ۴ درجه سانتیگراد انجامگرفت. جهت رنگ آمیزی ژل آکریل آمید از نیترات نقره استفاده شد. بررسی الگوهای ژنی مشاهده شده بر رویآکریل آمید نشان داد که الگوهای ایجاد شده برای هر سه نژاد ماکویی ، قزل و رومانوف تک شکل بوده و چندشکلیرا نشان نداد. عدم مشاهده چند شکلی را میتوان به نامناسب بودن ژن یا جایگاه تکثیر شده برای مطالعه پلیمورفیسم ارتباط داد.

کلیدواژه ها:

پلی مورفیسم ، ژن PPP۲CA ، PCR-SSCP ، چربی دنبه ، رومانوف ، قزل ، ماکویی