خالص سازی فوزوباکتریوم نوکلئاتوم از پاکت های پریودنتال دندانی

فوزوباکتریوم نوکلئاتوم (F. nucleatum) یک باکتری بی هوازی و گرم منفی و ازنظر ریخت شناسی باسیلی کشیده با انتهای تیز است که متعلق به خانوادهBacteroidaceae  است. F. nucleatum فلور طبیعی دهان است؛ اما در برخی بیماری ها در سایر اندام ها نیز وجود دارد. با توجه به نقش F. nucleatum در ایجاد و توسعه بیماری های انسانی، بررسی ویژگی ها و عملکردهای آن بسیار مهم است. برای انجام چنین مطالعاتی باید امکان جداسازی باکتری از نمونه های مختلف وجود داشته باشد؛ اما به دلیل بی هوازی اجباری بودن F. nucleatum، خالص سازی و نگهداری طولانی مدت باکتری ها با مشکلاتی مواجه است. هدف از انجام این مطالعه دستیابی به روشی بهینه به منظور خالص سازی F. nucleatum است تا بتوان زمینه مطالعه دقیق عملکردها و مکانیسم های عمل باکتری به منظور ارائه رویکردهای درمانی جدید برای کنترل یا درمان بیماری های ایجادشده توسط F. nucleatum را برای مطالعات آینده فراهم کرد. با استفاده از paper point با سایز ۴۰ از پاکت های پریودنتال عمیق ۱۶ بیمار با استفاده از محیط انتقالی Tryptic Soy Broth (روش اول) و محیط کشت کلمبیا آگار همراه با گاز پک نوع A و جار بی هوازی (روش دوم) نمونه گیری انجام شد. سپس نمونه ها به منظور تایید حضور F. nucleatum با مشاهدات ماکروسکوپی و میکروسکوپی، تست های بیوشیمیایی، تست PCR و توالی یابی بررسی شدند. نتایج نشان دادند محیط انتقالی Tryptic Soy Broth قادر به حفظ و زنده نگه داشتن باکتری نبوده است و F. nucleatum های خالص شده با انتقال مستقیم آنها به محیط کشت کلمبیا آگار همراه با گاز پک نوع A و جار بی هوازی جداسازی شدند. با توجه به بی هوازی اجباری بودن F. nucleatum، استفاده از محیط انتقالی به علت مواجهه بیشتر باکتری با اکسیژن هوا برای جداسازی کارآمد نیست و روش بهینه برای خالص سازی F. nucleatum دومین روش نمونه گیری است.

کلیدواژه ها:

فوزوباکتریوم نوکلئاتوم ، باکتری بی هوازی ، فلور سیستم گوارش ، پاکت پریودنتال ، سرطان روده بزرگ