اثر حلال فرازودگداز بر پایداری و ساختار آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ با هدف درمانی
محل انتشار: فصلنامه زیست فناوری، دوره: 9، شماره: 3
سال انتشار: 1397
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 89
فایل این مقاله در 7 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_BIOT-9-3_013
تاریخ نمایه سازی: 5 دی 1403
چکیده مقاله:
اهداف: آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ در پیشرفت روند بسیاری از بیماری ها مانند پریودنتیت، آترواسکلروزیس و سرطان ها نقش بسزایی دارد. یکی از روش های پایداری آنزیم استفاده از حلال های فرازودگداز است. هدف این پژوهش، بررسی اثر حلال فرازودگداز روی پایداری و ساختار آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ با هدف درمانی بود.
مواد و روش ها: در پژوهش تجربی حاضر، آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ فرم فعال (۷۰۷-۱۰۷ توالی رزیدوی آمینواسیدی) با استفاده از وکتور بیانی pET۲۱a در باکتری اشریشیا کلی سویه BL۲۱ بیان و تخلیص و ریفولدینگ آنزیم توسط روش گرادیان شیب اوره به طور همزمان روی ستون نیکل سفارز انجام شد. سپس تاثیر حلال فرازودگداز بر پایه کولین کلراید و گلیسرول با نسبت مولی ۱:۱ بر فعالیت، پایداری و ساختار آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ بررسی شد. فعالیت آنزیم در غلظت های مختلف ژلاتین در حضور حلال های فرازودگداز ۱۵ و ۳۰% حجمی/حجمی در ۷/۸=pH برای به دست آوردن Vmax و km با رسم نمودار میکائیلیس- منتن و استفاده از نرم افزار Prism version ۵.۰ مورد بررسی قرار گرفت.
یافته ها: با افزایش درصد حلال ها تا ۳۰%، فعالیت ویژه آنزیم افزایش یافت و پس از آن روند کاهشی داشت و در حضور حلال ۳۰% حجمی/حجمی در دو دمای ۵۰ و ۶۰ºC در مقایسه با حلال ۱۵% و عدم حضور حلال دارای فعالیت باقیمانده بیشتری بود. نتایج نشان دهنده پایداری بیشتر آنزیم در حلال ۳۰% بود.
نتیجه گیری: آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ در حضور حلال فرازودگداز ۳۰% حجمی/حجمی بر پایه کولین کلراید و گلیسرول دارای بیشترین فعالیت و پایداری است. افزایش پایداری حرارتی آنزیم را می توان به فشردگی ساختار آن در حضور حلال فرازودگداز نسبت داد.
کلیدواژه ها:
Matrix Metalloproteinase ۹ ، Deep Eutectic Solvent ، Thermal Stability ، Residual Activity ، آنزیم ماتریکس متالوپروتئیناز ۹ ، حلال فرازودگداز ، پایداری حرارتی ، فعالیت باقیمانده
نویسندگان
سارا محسنی
Nanobiotechnology Department, Biological Sciences Faculty, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
خسرو خواجه
Biochemistry Department, Biological Sciences Faculty, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
طاهره توحیدی مقدم
Nanobiotechnology Department, Biological Sciences Faculty, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
بهاره دبیرمنش
Biochemistry Department, Biological Sciences Faculty, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
مژده حدادی
Biochemistry Department, Biological Sciences Faculty, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
