شناسایی تنوع سوماکلونال با استفاده از نشانگرهای پراکسیداز و میکروستلایت در Eucalyptus microtheca F. Muell

هدف از این پژوهش ایجاد تنوع سوماکلون در کشت درون شیشه Eucalyptus microtheca بود. برای این منظور ریزنمونه های سرشاخه های سبز نهال یک ساله E. microtheca در محیط MS (با نیمی از مقادیر NH۴NO۳ و KNO۳) همراه با سطوح متفاوت هورمون های NAA (α-Naphthalene Acetic Acid)، Kin (Kinetin) و TDZ (Thidiazuron)کشت گردیدند. به عنوان نشانگر بیوشیمیایی، الگوی باندهای پراکسیداز به روش PAGE در گیاهچه های باززایی شده، بررسی شد تا تاثیر مقادیر متفاوت هورمون TDZ بر روی مکان های ژنی بیان کننده این آنزیم مشخص شود. به طوری که یک مکان ژنی دیمر، یک مکان ژنی تترا مر و دو باند اپی ژنتیک وجود داشت و تغییرات ژنوم گیاهچه های سوماکلون با استفاده از نشانگر مولکولی SSR ارزیابی گردید. دو پرایمر استفاده شده نشان دهنده وجود چند شکلی بودند. تجزیه و تحلیل های آماری ناپارامتری وجود اثر معنی دار توالی های ساده تکرار شونده بر آلل های پراکسیداز را تایید نمود. بنا به نتایج پایداری مکان ژنی دیمر در مقادیر مختلف TDZ کمتر از مکان ژنی تترامر بود، همچنین همبستگی بیشتری میان آلل های مکان ژنی تترامر و توالی های ساده تکرار شونده وجود داشت.

کلیدواژه ها:

Tissue culture ، Somaclonal Variation ، peroxidase ، Simple Sequence Repeat ، EUCALYPTUS MICROTHECA