بررسی اثر هم افزایی نانومیسل کورکومین و اپی کاتچین در آپوپتوز و پرولیفراسیون سلول های سرطان کولون رده سلولی HT۲۹

سابقه و هدف: امروزه به رغم فراوانی داروهای شیمیایی، استفاده از گیاهان دارویی در حال افزایش است. کورکومین (curcumin) رنگدانه زرد رنگی است که از گیاه زردچوبه به دست می آید و در واقع ماده موثر زردچوبه محسوب می شود. این فراورده کریستالی و متبلور در مصارف پزشکی هند کاربرد بسیاری دارد. اخیرا اثرات مفید کورکومین بر سرطان های معده، کولون و دهان در موش سوری به اثبات رسیده است. کورکومین نقش خود را معمولا از طریق پروسه های فارماکولوژیکی از قبیل اثرات آنتی اکسیدانی،ضدالتهابی، آنتی ترومبوتیک، آپوپتوتیک و اثرات حفاظتی کبدی ایفا می کند. خواص آنتی اکسیداتیو، آنتی پرولیفراتیو سلولی و آنتی آنژیوژنیک کورکومین درسال های اخیر مورد توجه قرارگرفته است، اما حلالیت کم کورکومین و تخریب شدید آن باعث عدم امکان معرفی آن در کاربرد بالینی شده است، درنتیجه مطالعات و بررسی هایی برای تهیه و طراحی polymeric micelles (PMMCs) در مقیاس نانو برای بهبود انتقال سلولی کورکومین صورت پذیرفته است. فلاونوئیدهای چای سبز ازجمله اپی کاتچین اخیرا مورد توجه قرارگرفته است. درتحقیقات in vitro این ترکیبات از طریق مهار لیپید پروکسیداسیون، به چنگ انداختن رادیکال های آزاد و شلاته کننده یون های فلزی، به عنوان آنتی اکسیدانت مطرح شده اند که این خاصیت به دلیل وجود ساختار بی نظیر آن ها ذکر شده است، لذا هدف از این مطالعه تعیین اثر هم افزایی کورکومین و اپی کاتچین در بررسی آپوپتوز و پرولیفراسیون سلول های سرطان کولون رده های سلولی HT۲۹ و فاکتورهای آپوپتوتیک صورت گرفته است. مواد و روش ها: این مطالعه یک مطالعه تجربی بوده و پس از تهیه سلول های HT۲۹ از بانک سلولی انستیتو پاستور و پاساژ و تکثیر سلولی، سلول ها به صورت چاهک های سه تایی(triplicate) در۷ گروه تست و ۲ گروه کنترل مثبت و منفی تفسیم شدند، در گروه های تست شماره ۱و۲و۳و سه غلظت نانو میسل کورکومین (۱۰، ۲۰، µg/ml۵۰) به صورت triplicate و هم چنین در گروه های ۴ و۵و۶ سه غلظت اپی کاتچین (۱۰، ۲۰، µg/ml۵۰) به مدت ۲۴ ساعت انکوبه شدند و در گروه تست ۷: سلول های HT۲۹ با غلظت IC۵۰ نانو میسل کورکومین + IC۵۰ اپی کاتچین وگروه ۸کنترل مثبت: سلول ها تحت تاثیر ۵FU(۱۰۰µg/ml) و گروه ۹، کنترل منفی صرفا تحت تاثیر محیط کشت سلولی قرار گرفتند و پس از دوره انکوباسیون سلولی ۲۴ ساعته، تست های MTT برای بررسی پرولیفراسیون و روش Annexin flowcytometery برای تعیین میزان آپوپتوز انجام گرفت. یافته ها: اپی کاتچین و کورکومین با افزایش میزان آپوپتوز توانستند باعث افزایش مرگ در سلول های سرطان کولون (HT۲۹) گردند، که با افزایش دوز این موضوع به بیش ترین حد خود رسید و هم چنین ترکیب این دو دارو در high dose باعث اثر هم افزایی شده که اثر بیش تری نسبت به هر کدام به تنهایی نشان داده است(۰/۰۵>P). اپی کاتچین در غلظت ۲۰,۱۰ و μg/mL ۵۰ و۱۰۰ نسبت به گروه کنترل منفی با ۰/۰۵P< دارای اختلاف معنی دار بوده که این امر با افزایش دوز باعث کاهش میزان حیات سلولی در سلول های سرطان کولون شده است.کورکومین در گروه نانومیسل به همراه اپی کاتچین در غلظت IC۵۰ نسبت به گروه کنترل مثبت ۵-FU در رده سلولی HT-۲۹ میزان حیات سلولی بسیار کاهش یافته است. نتایج حاصل از بررسی میزان آپوپتوز سلولی در گروه های نانومیسل کورکومین و اپی کاتچین در غلظت های IC۵۰ در رده سلولی HT-۲۹ نشان داده که نانومیسل کورکومین و اپی کاتچین اثر هم افزایی داشته اند. استنتاج: مطالعه حاضر بیانگر اثرات ضد سرطانی اپی کاتچین و نانومیسل کورکومین می باشد. هم چنین ترکیب این دو دارو باعث اثر هم افزایی می شود. در ضمن از این دو ترکیب می توان به عنوان کاندیدهای درمان کانسر کولون در رژیم های درمانی استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

colon cancer ، epicatechin ، nano-curcumin ، apoptosis ، proliferation ، HT۲۹ cell line ، سرطان کولون ، اپی کاتچین ، نانوکورکومین ، آپوپتوز ، پرولیفراسیون ، رده سلولی HT۲۹