Real time LAMP جهت تشخیص انتقال ژن GUS به گیاه توتون

بیانیه پروتئین با تأکید بر بافت مناسب، افزایش پایداری و تجمع آن با استفاده از عوامل هدف‌گیری کننده به جایگاه‌های مناسب در سلول و همچنین جلوگیری از خاموشی ترنس ژن از مهم‌ترین عوامل مؤثر بر تولید پروتئین‌های متکی بر گیاه می‌باشد و با تنی کردن توالی های مناسب و ساز ژنی قابل تحقق است. بر این منظور در تحقیق حاضر، ساز حامی ژن GUS به همراه توالی SS در بالادست و توالی های KDEL و MAR در پایین دست تحت کنترل پیش برد اختصاصی بذر طراحی و تهیه شد. جهت توالی ساز به گیاه، ریز نمونه‌های برگ توتون به اندازه 1-0/5 سانتی‌متر واه اگروباکتریوم سویه LBA4404 حاوی ساز مدنظر تلقیح و به مدت 48 ساعت در محیط هم کشتی (شامل MS ، mg/L0/1 NAA ، mg/L3 BAP ) نگهداری شدند. گزینش جوانه‌های بازویی شده هم در محیط گزینش گر (شامل محیط هم کشتی، mg/L 25 کانامایسین ، mg/L 200 سفاتوکسیم ) و هم در محیط بین گزینش گر با استفاده از واکنش Real time LAMP انجام شد و مشخص شد که با این روش می‌توان واکنش را به صورت مانیتورینگ مشاهده کرد.

کلیدواژه ها:

ژن GUS ، واکنش LAMP ، و واکنش Real time LAMP