ارزیابی آزمایشگاهی کیفیت اسپرم منجمد شدهی قوچ با رقیق کنندههای مختلف برای استفاده در تلقیح مصنوعی، لقاح آزمایشگاهی، مهندسی ژنتیک و حفظ ذخایر ژنی

حفظ انجماد منی و تلقیح مصنوعی فواید زیادی را برای صنعت پرورش حیوانات اهلی، به ویژه برای بهبود تولید مثلی و ژنتیکی و افزایش تولیدات دامی ارائه میکنند، اما بزرگترین مانع در حفظ انجماد منی، آسیبی است که به ساختمان اسپرم در طول فرآیند انجماد - ذوب وارد میشود که منجر به باروری ضعیف اسپرم منجمد میگردد. بنابراین هدف این مطالعه ارزیابی اثر رقیق کنندههای مختلف منی روی پارامترهای کیفیت باروری اسپرم و در نتیجه تولید بهترین رقیق کننده منی قوچ برای انجماد آن در جهت استفاده برای تلقیح مصنوعی، لقاح آزمایشگاهی و حتی مطالعات مهندسی ژنتیک (انتقال ژن از طریق اسپرم) و حفظ ذخایر ژنتیکی نژادهای برتر و در حال انقراض بود. برای انجام مطالعه، هفت انزال از چهار قوچ بالغ نژاد زندی ( 3 تا 5 ساله) با استفاده از واژن مصنوعی، دوبار در هفته در طول فصل تولید مثلی جمع آوری شد. بلافاصله بعد از جمع آوری و ارزیابی اولیه منی، انزالهای جمع آوری شده مخلوط و برای آزمایشات استفاده شدند. چهار رقیق کننده مختلف با اضافه کردن سطوح مختلف لسیتین 1 ، 105 و 2 درصد و زرده تخم مرغ ( 20 درصد) به رقیق کنندهی بر پایه تریس، آماده شد. منی رقیق شده برای مدت 2 ساعت به تدریج تا 5 درجه سانتیگراد سرد و سپس به داخل پایوتهای 0/25 میلی لیتری کشیده شد. بلافاصله پایوتها در فاصله 5 سانتی متری بخار نیتروژن مایع به مدت 12 دقیقه قرار و سپس به داخل نیتروژن مایع غوطه ور و تا زمان ذوب ذخیره شدند. پارامترهای ارزیابی اسپرم بعد از فرآیند انجماد- ذوب شامل جنبایی (با سیستم آنالیزکامپیوتری اسپرم CASA) زندهمانی و یکپارچگی غشای پلاسمایی اسپرم بودند. نتایج نشان داد که میانگین جنبایی کل و پیش رونده (به ترتیب 1/01 ± 54/43 و 0/7 ± 25/43 درصد)و زنده مانی 1/19 ± 59/14 درصد و یکپارچگی غشای پلاسمایی اسپرم 1/07 ± 48/8 در رقیق کنندهی منی دارای 1/5 درصد لستین سویا، به طور معنی داری 0/05 > P بالاتر از سایر رقیق کنندهها بودند. علاوه براین اختلاف معنی داری 0/05 > P بین پارامترهای ارزیابی شده دو تیمار 1 درصد لستین سویا و 20 درصد زرده تخم مرغ پیدا نشد. در نتیجه، با توجه بهنتایج به دست آمده از این مطالعه، رقیق کنندهی دارای 1 درصد لستین سویا میتواند به عنوان یک جایگزین زرده تخم مرغ و رقیق کنندهی دارای 105 درصد لستین سویا میتواند کارآمدتر و بهتر از زرده تخم مرغ و سایر سطوح لسیتین سویا در حفظ انجمادی منی قوچ با توانایی بالای حفظ کیفیت اسپرم در طول فرآیند انجماد- ذوب استفاده شود.

کلیدواژه ها:

انجماد منی ، رقیق کننده ، ارزیابی اسپرم ، تلقیح مصنوعی ، مهندسی ژنتیک