بررسی اثرات سایتوتوکسیک نانو ذرات نقره بر سلول های کلیوی نوزاد همستر و تاثیر واکسن تخفیف حدت یافته ویروس زبان آبی بر تولید اینترفرون در گوسفند

زمینه وهدف: نانو ذرات نقره اثر تخریبی بر روی پوشش و غشای گلیکوپروتئینی میکروارگانیسم ها و همچنین سلول های زنده دارد. نانو ذرات نقره با تخریب پل های دی سولفیدی در پروتیین های سطحی میکروارگانیسم موجب غیر فعال شدن آنها می شوند. سلول های BHK۲۱ (سلول کلیه ی بچه همستر) یکی از پرکاربردترین رده ها ی سلولی نامیرا هستند که برای تکثیر برخی از ویروس ها مورد استفاده قرار می گیرند. در این تحقیق اثرات نانو ذرات نقره بر سلول های زنده BHK۲۱ و میزان ترشح اینترفرون پس از تزریق واکسن تخفیف حدت یافته ویروس زبان آبی به گوسفند افشاری مورد بررسی قرار گرفته است. روش کار: برای محاسبه تیتر نانو نقره، سلول هایBHK۲۱ به مقدار مساوی در پلیت های ۲۴ خانه تقسیم شدند. پس از رشد سلول ها، محلول مادر نانو ذرات نقره با غلظت ppm۴۰۰۰ را با استفاده از محیط کشت RPMI به میزان۰.۱ رقیق کرده و در پلیت های ۲۴ خانه با ۴ تکرار رقت سریال، از ۱ -۱۰ تا ۶-۱۰ تنظیم گردید. سپس، واکسن BTV از طریق سلول های BHK۲۱ تولید و به ۳ راس گوسفند سرونگاتیو از نژاد افشاری تزریق و خون گیری به مدت ۱۰روز انجام و پلاسمای خون در داخل لوله های اپندورف ۱.۵ میلی لیتری جدا سازی و وجود اینترفرون در پلاسمای خون بررسی گردید.یافته ها و نتیجه گیری: محلول نانو ذرات نقره با غلظت کمتر از ۰.۴ ppm موجب مرگ سلول های BHK۲۱ نگردید ولی در غلظت های بالاتر از ۰.۴ اثر سایتوپاتیک مشاهده گردید. واکسن تخفیف حدت یافته BTVبا تحریک سیستم ایمنی ذاتی گوسفند برای جلوگیری از تکثیر ویروس در روزهای اول و دوم موجب القای ترشح اینترفرون شد. در روز سوم که ویروس ماده ژنتیکی خود را به درون سلول ها تزریق کرده و پوشش خود را از دست داد تحریک سیستم ایمنی و ترشح اینترفرون نیز کمتر شد. در روز چهارم به دلیل آزاد شدن ویروس های جدید مجددا ترشح اینترفرون آغاز و تا روز پنجم به اوج خود رسید، از روز پنجم، با افزایش فعالیت سیستم ایمنی هومورال، ضمن ترشح آنتی بادی علیه ویروس، با یک فید بک منفی مقدار ترشح اینترفرون نیز کاهش پیدا کرد. براساس یافته ها مشخص گردید نانو ذرات نقره دارای اثرات کشندگی بر روی سلول های زنده هستند و غلظت بالاتر از ppm۴/۰ می تواند خطر آفرین باشد. همچنین واکسن BTV با تحریک سیستم ایمنی ذاتی به طور موقت و به منظور کمک به سیستم ایمنی اکتسابی از تکثیر ویروس جلوگیری می کند.

کلیدواژه ها:

نانو ذرات نقره ، سلول های BHK۲۱ ، بیماری زبان آبی ، گوسفند