تشخیص و ردیابی مایکوپلاسما سینوویه از مرغداری های صنعتی بااستفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس ژنvlhA

مایکوپلاسما سینوویه مهمترین عامل بیماریزا در ماکیان است و همه سالهخسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. مایکوپلاسما سینوویه قادر به بیان لیپوپروتئین هماگلوتینین متغیرvlhA Variable lipoprotein hemagglutinin A می باشد که نقش مهمی در ایجاد بیماری ایفا می کند. هدف اصلی این مطالعه تشخیص و شناسایی جدایه های مایکوپلاسما سینوویه بر اساس ژنvlhA بود. از گله های طیور صنعتی سه استان (تهران، مرکزی و قزوین) که دارای علائم مشکوک به آلودگی بودند، توسطسوآپ های کتانی و از شکاف حلقی کامی، نای و کیسه های هوائی نسبت بهنمونه گیری اقدام شد. در این مطالعه ضمن جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما با استفاده از روش کشت و آزمون PCR جنس مایکوپلاسما، نسبت به آزمون PCR برای ناحیه محافظت شده ژن vlhA مایکوپلاسما سینوویه نیز مبادرت گردید و بدین ترتیب علاوه بر پرایمرهای اختصاصی جنس مایکوپلاسما از جفت پرایمر مربوط به ناحیه محافظت شده انتهای آمینی ژن مربوط به ناحیه محافظت شده انتهای آمینی ژن vlhA استفاده گردید. در نتایج مشاهده شد که محصول PCR تولیدی برای پرایمرهای اختصاصی ژن vlhA در نمونه های مثبت مایکوپلاسما سینوویه، ۳۵۰-۴۰۰ جفت بازی برای هر جدایه بر روی ژل الکتروفورز تشکیل داده شد و از بین ۴۳ نمونه مورد مطالعه، در روش کشت، ۲۸ (۶۵%) نمونه مثبت مشاهده گردید و در آزمون PCR جنس مایکوپلاسما، ۳۳ (۷۶%) نمونه و همچنین ۲۴ (۵۵%)نمونه در آزمون PCR ژن vlhA مایکوپلاسما سینوویه، مثبت گزارش شدند. نتایج این مطالعه نشان می دهد که آزمون PCR در ناحیه́ ۵ ژن vlhA مایکوپلاسما سینوویه جهت شناسایی جدایه ها کاربردی بوده و همچنین به علت دربرداشتن نواحی RII ،RI و ناحیه پلی مورفیسم ،RIII با کارایی و حساسیت بالا، می تواند جهت تشخیص و ردیابی گونه مایکوپلاسما سینوویه مورد استفاده قرار گیرد

کلیدواژه ها:

مایکوپلاسما سینوویه