تثبیت آنزیم پروتئاز Penaeus vanamei بر روی نانولوله های کربنی و بررسی فعالیت و پایداری آن

پسماند صنعت آبزیان غنی از پروتئین بوده و بهترین راه بدست آوردن این مواد آلی استفاده از آنزیم های پروتئاز است. از این رو، انتخاب یک پروتئاز مقاوم از یک گونه آبزی و استفاده از یک بستر مناسب برای تثبیت و استفاده طولانی مدت آن بسیار با اهمیت است. در این پژوهش پروتئاز خالص شده از میگوی Penaeus vanamei روی نانولوله های کربنی چندجداره (MWCNTS) تثبیت شد. پس از فعال کردن نانولوله ها با اسید نیتریک، به منظور اتصال الکترواستاتیک آنزیم به آن، محلول پروتئینی با غلظت mg/mL۷ به نانولوله ها اضافه شد و محلول به دست آمده به مدت ۴ ساعت در دمای C°۱۰ انکوبه شد. بعد از ۳ بار شستشو با بافر فسفات (pH ۵/۷)، نانوآنزیم در mL۱ بافر فسفات حل شد. بر اساس نتایج به دست آمده، تثبیت آنزیم روی بستر نانولوله های کربنی، پایداری طولانی مدت، پایداری حرارتی و پایداری درpH های بحرانی را به میزان قابل توجهی بهبود بخشید. دمای بهینه آنزیم تثبیت شده از۶۰ به C°۸۰ افزایش یافت و pH بهینه تغییری نکرد. شاخص های سینتیکی آنزیم (Km و kcat) نیز در هنگام تثبیت دستخوش تغییر شدند. این نتایج نشان می دهد که از آنزیم پروتئاز Penaeus vanamei تثبیت شده بر روی نانولوله های کربنی چندجداره، به دلیل پایداری بالا، می توان برای کاربردهای بیوتکنولوژی استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

تثبیت ، آنزیم پروتئاز ، میگوی Penaeus vanamei ، نانولوله های کربنی چندجداره