بیان هم زمان فاکتور رشد عصبی نوترکیب انسانی با چاپرون تریگر فاکتور در E. coli
سال انتشار: 1397
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 134
فایل این مقاله در 8 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NBR-5-3_001
تاریخ نمایه سازی: 8 آذر 1402
چکیده مقاله:
. فاکتور رشد عصبی (NGF) یک فاکتور نوروتروفیک است که در حفظ، بقا و تمایز سلول های سیستم عصبی نقش دارد. پروتئین NGF دارای سه زیر واحد است که زیر واحد β آن فعالیت اصلی را بر عهده دارد. این پروتئین از موتیف گره سیستئینی که در آن رشته های β با پیوندهای دی سولفیدی به یکدیگر متصل شده اند، تشکیل شده است. NGF برای درمان بسیاری از بیماری ها استفاده می شود. به دلیل اینکه NGF استخراج شده از منابع طبیعی برای درمان نامناسب است، بسیاری از محققین برای تولید – NGFβ نوترکیب تلاش کرده اند. در این مطالعه، به منظور افزایش بیان NGF، این پروتئین به طور هم زمان با چپرون Trigger Factor در E. coli بیان شد. بدین منظور pET۳۹b(+)::β-NGF و پلاسمید چپرونی pTF۱۶ به E. coli BL۲۱(DE۳) انتقال یافتند. پس از القای هر پروموتر، کل محتوی پروتئینی و پروتئین های پری پلاسمی بطور جداگانه استخراج شدند. به منظور تایید تاثیر TFبر میزان بیان کلی و تولید –NGFβ محلول، تکنیک های برادفورد و دات بلات و نرم افزار ImageJ استفاده شدند. سپس –NGFβ با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی (Ni۲+-NTA) تخلیص شد. همچنین به منظور مطالعه عملکرد NGF-β تخلیص شده، رده سلول های PC۱۲ با پروتئین به مدت یک هفته تیمار شدند. داده ها نشان دادند که بیان هم زمان با چپرون TF می تواند سبب افزایش تولید پری پلاسمی و محلول –NGFβ و نه کل محتوی پروتئینی شود. همچنین تیمار سلول های PC۱۲ با –NGFβ تخلیص شده (بیان شده با چپرون TF)، منجر به تمایز سلول های PC۱۲ به سلول های عصبی شد، که نشان دهنده عملکردی بودن پروتئین تولید شده است. داده های این مطالعه نشان دهنده این است که بیان هم زمان چپرون سیتوپلاسمی TF با پروتئین NGF ممکن است یک روش موثر در تولید مناسب فاکتور رشد عصبی نوترکیب (rhNGF) محلول و فعال باشد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
Seyedeh Mahdieh Sadadt
University of Tehran,
Zahra Hajihassan
University of Tehran,
Mohammad Barshan-tashnizi
University of Tehran, Tehran, Iran
Mehri Abdi
Department of Life Science Engineering, Faculty of New Sciences and Technologies, University of Tehran, Tehran, Iran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :