تعیین نسبت زنجیره آلفا/بتا در افراد سالم(۴۵-۱۸ سال) با اندکس های خونی طبیعی(۸۰MCV≥ و ۲۷MCH≥ ) و درصد HbA۲ طبیعی به روش کروماتوگرافی تعویض کاتیونی

چکید ه   سابقه و هدف   برای موفقیت بیشتر برنامه پیشگیری از تالاسمی، انجام آزمایش بیوسنتز زنجیره های گلوبین به عنوان یک آزمایش تکمیلی در کنار تجزیه DNA ضروری می باشد. با توجه به اهمیت موضوع، هر آزمایشگاهی باید دامنه مرجع این آزمایش را متناسب با روش به کار گرفته جهت افتراق انواع سندرم های تالاسمی به دست آورد. روش بیوسنتز زنجیره های گلوبین روش نسبتا مشکل ولی مرجع جهت مطالعه سندرم های تالاسمی می باشد. هم چنین برای تعیین جهش های ساختمانی زنجیره های گلوبین کاربرد دارد. هدف از این مطالعه، راه اندازی روش بیوسنتز زنجیره های گلوبین و تعیین نسبت زنجیره های a / b در افراد سالم بود.   مواد وروش ها   مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. در این مطالعه نسبت زنجیره های گلوبین در دو مرحله بر اساس روش کلگ ودرال(تغییر شکل یافته) اندازه گیری گردید. آنالیز زنجیره های گلوبین بر روی ۳۰ پرسنل آزمایشگاهی سالم و بستگان آن ها که دارای درصد HbA۲ و اندکس های خونی نرمال بودند صورت گرفت. در این روش، نمونه غنی از رتیکولوسیت با مخلوطی از اسیدهای آمینه که یکی از آن ها(لوسین) با مواد رادیو ایزوتوپ نشان دار شده، انکوبه می گردد. پس از شستشوی اضافه رادیو اکتیویته و رسوب گلوبین، زنجیره های مختلف به وسیله کروماتوگرافی تعویض کاتیونی، از یکدیگر جدا می شوند.   یافته ها   در این تحقیق نسبت زنجیره های a / b در همکاران سالم آزمایشگاهی بدون سابقه b تالاسمی در خانواده محاسبه گردید. میانگین نسبت زنجیره، ۱۲/۰ ± ۰۴۵/۱( SD ۱ ± mean ) با دامنه ۱۶۵/۱ – ۹۲۵/۰ به دست آمد که این نسبت با نسبت به دست آمده توسط سایر محققان در دنیا هم خوانی داشت.   نتیجه گیری   در هر برنامه غربالگری تالاسمی، مشکلات تشخیص به وجود می آید که بدون آزمایش بیوسنتز زنجیره ها قابل حل نمی باشند. روش کلگ ودرال در حالی که از قابلیت تکرارپذیری و قابلیت اعتماد خوبی برخوردار است، بسیار طولانی می باشد(۴ روز کاری). امروزه از روش های دیگری مانند HPLC فاز معکوس نیز برای جداسازی زنجیره ها استفاده می گردد. بنابراین هر آزمایشگاهی متناسب با روشی که به کار می برد باید دامنه مرجع خود را تعیین نماید.   کلمات کلیدی : a گلوبین، b گلوبین، هموگلوبین، محدوده طبیعی، کروماتوگرافی تعویض یونی

کلیدواژه ها:

Alpha globin ، Beta globin ، Hemoglobin ، Normal range ، Ion exchange chromatography ، آلفا گلوبین ، بتا گلوبین ، هموگلوبین ، محدوده طبیعی ، کروماتوگرافی تعویض یونی