Cloning and Expression of Helicobacter Pylori CagA Gene Antigenic Regions in E. coli
محل انتشار: مجله علوم پیشرفته زیست پزشکی، دوره: 6، شماره: 1
سال انتشار: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 159
فایل این مقاله در 7 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JABS-6-1_013
تاریخ نمایه سازی: 9 آبان 1402
چکیده مقاله:
زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری شایع ترین پاتوژن گوارشی است که نیمی از مردم دنیا را آلوده ساخته و مهمترین علت بیماریهای معدهای-رودهای از جمله گاستریک مزمن، زخم معده و دوازدهه، سرطان معده و لنفوما است. ژن CagA )سیتوتوکسین مرتبط با ژن A ( یکی از مهمترین شاخصهای بیماری زای این باکتری است. هدف از این تحقیق ساخت ناقل نوترکیب حامل نواحی آنتیژنیک ژن CagA و بیان آن در میزبان بیانی میباشد.
مواد و روشها: برای رسیدن به این هدف بر اساس برنامههای بیوانفورماتیکی ناحیهای از ژن CagA که دارای بالاترین خاصیت آنتیژنیک بود شناسایی شده و بر اساس آن قطعهای به طول ۹۹۶ جفت باز با استفاده از روش PCR تکثیر شد. این قطعه با استفاده از هضم آنزیمی در ناقل pET۳۲a کلون و سپس به داخل باکتری E.coli سویه BL۲I(DE۳) ترنسفورم و بیان گردید.
نتایج: نتایج توالی یابی کلونینگ موفق ژن CagA را در حامل بیانی نشان داد. وزن مولکولی پروتئین نوترکیب تولید شده بر روی ژل SDS-PAGE ، ۵۷ کیلو دالتون بر آورد شد و صحت بیان پروتئین تایید گردید.
نتیجه گیری: بر اساس نتایج این مطالعه کلونینگ ناحیه اپی توپی مورد نظر با موفقیت انجام شده و احتمالا میتوان پروتئین نو ترکیب به دست آمده را به عنوان کاندیدای مناسبی برای تولید IgY حاصل از مرغهای ایمن شده برای کنترل عفونت هلیکوباکتر پیلوری در انسان، طراحی کیتهای تشخیصی و تولید واکسن هلیکوباکترپیلوری معرفی نمود .
کلیدواژه ها:
نویسندگان
مهدیه مالکی
Animal Science Department, College of Agriculture, Ferdowsi university of Mashhad, Mashhad, Iran
محمد رضا نصیری
Animal Science Department, College of Agriculture, Ferdowsi university of Mashhad, Mashhad, Iran
مجتبی طهمورث پور
Animal Science Department, College of Agriculture, Ferdowsi university of Mashhad, Mashhad, Iran
کیارش قزوینی
Department of Microbiology, School of Medicine, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran