تشخیص و افتراق سریع فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از روش loop-mediated Isothermal Amplification

سال انتشار: 1395
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 712

فایل این مقاله در 9 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_JMUMS-26-145_006

تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402

چکیده مقاله:

سابقه و هدف: فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا فلوک های کبدی شایعی بوده که روی انسان ها و دام ها در تمام نقاط جهان اثرگذار هستند. در مطالعه حاضر ما تکنیک سریع loop-mediated isothermal amplification (LAMP) را در تشخیص و افتراق گونه های فاسیولا ارزیابی نمودیم. مواد و روش ها: تعداد ۵۰ کرم فاسیولا از کبد گاو و گوسفند کشتارگاه های استان مازندران جداسازی شدند. تعداد ۸ پرایمر جهت تکثیر ناحیه ژنی ۲۸S ribosomal RNA برای واکنش LAMP برای گونه های فاسیولا طراحی گردید. واکنش LAMP در حجم µI ۲۰ تحت شرایط تک دمایی در۰C ۶۰ به مدت ۹۰ دقیقه انجام گرفت. نتایج تکثیر با دیدن رسوب با استفاده از چشم غیر مسلح، استفاده از رنگ فلوئورسانس و ژل الکتروفورز بررسی شد. اختصاصیت روش LAMP برای فاسیولا با استفاده از DNA انگل های دیکروسلیوم دندریتیکم، تریکواسترونژیلوس کالابریفورمیس و اکینوکوکوس گرانولوزوس مورد سنجش قرار گرفت. جهت ارزیابی محدودیت تشخیص روش LAMP برای تعیین جنس فاسیولا رقت سریالی از DNA استخراج شده مورد استفاده قرار گرفت. یافته ها: واکنش مثبت LAMP با استفاده از پرایمرهای اختصاصی دو گونه تعداد زیادی باند در سایزهای متفاوت در دمای ۰C۶۰ طی مدت ۹۰ دقیقه تولید نمود. شرایط مطلوبی بدون هیچ واکنشی با سایر DNA انگل ها ایجاد گردید. محدودیت تشخیص روش LAMP تا pg ۱ تعیین گردید. نتایج تشخیص رسوب و رنگ فلوئورسانس با الکتروفورز با ژل آگارز همخوانی داشتند. استنتاج: نتایج ما نشان دادند که روش LAMP یک روش سریع، آسان، کم هزینه با اختصاصیت بالا و معتبر جهت افتراق گونه های فاسیولا در مطالعات اپیدمیولوژیکی و بالینی فاسیولوزیس انسانی و دامی در مناطق اندمیک می باشد.

کلیدواژه ها:

Fasciola hepatica ، Fasciola gigantica ، loop-mediated isothermal amplification (LAMP) ، فاسیولا هپاتیکا ، فاسیولا ژیگانتیکا ، loop-mediated isothermal amplification (LAMP)

نویسندگان

آزاده میزانی

۱ PhD Student in Medical Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran ۲ PhD Student in Medical Parasitology, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

پوریا گیل

Associate Professor, Department of Physiology, Pharmacology and Nanotechnology, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

شهاب الدین سروی

Associate Professor, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

احمد دریانی

Professor, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

مهدی شریف

Professor, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

افسانه عمویی

PhD Student in Medical Parasitology, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

علی باکویی کتریمی

MSc in Veterinary Parasitology, Mazandaran Provincial Veterinary Service, Sari, Iran

سید عبدالله حسینی

PhD Student in Medical Parasitology, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Khalifa RMA, Hassanin ASA, Monib MESMM, Yones DA, EL-Ossily NAA, ...
  • Hayashi K, Ichikawa-Seki M۲, Mohanta UK, Singh TS۳, Shoriki T, ...
  • Rokni MB, Mirhendi H, Mizani A, Mohebali M, Sharbatkhori M, ...
  • Ai L, Li C, Elsheikha HM, Hong SJ, Chen JX, ...
  • Nagamine K, Hase T, Notomi T. Accelerated reaction by loop-mediated ...
  • Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, Yonekawa T, Watanabe K, ...
  • Sahba GH, Arfaa F, Farahmandian I, Jalali H. Animal fascioliasis ...
  • Muller R, Wakelin D. Worms and Human Diseases, ۲nd ed. ...
  • Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory ...
  • Mizani A, Gill P, Sarvi Sh, Daryani A, Sharif M, ...
  • Mori Y, Notomi T. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): a rapid, ...
  • Versalovic J, Lupski JR. Molecular detection and genotyping of pathogens: ...
  • Mori Y, Nagamine K, Tomita N, Notomi T. Detection of ...
  • Kalinina O, Lebedeva I, Brown J, Silver J. Nanoliter scale ...
  • Tomita N, Mori Y, Kanda H, Notomi T. Loop-mediated isothermal ...
  • Nagamine K, Kuzuhara Y, Notomi T. Isolation of single-stranded DNA ...
  • Karami A, Gill P, Motamedi M, Saghafinia M. A review ...
  • Kaneko H, Kawana T, Fukushima E, Suzutani T. Tolerance of ...
  • Mori Y, Kanda H, Notomi T. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): ...
  • Adams ER, Schoone GJ, Ageed AF, Safi SE, Schallig HD. ...
  • Rafati A, Gill P. Microfluidic method for rapid turbidimetric detection ...
  • نمایش کامل مراجع