ورود
مقالات فارسیISIکنفرانسهاژورنالها

ساخت پلاسمید نوترکیب بیان کننده ژن AID تحت کنترل پروموتر حساس به حرارت باکتریوفاژ لامبدا

محل انتشار: مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، دوره: 29، شماره: 172
سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 318

فایل این مقاله در 10 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:
https://civilica.com/doc/1785882

شناسه ملی سند علمی:

JR_JMUMS-29-172_010

تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402

چکیده مقاله:

سابقه و هدف: آنزیم Activation-induced cytidine deaminase (AID) یک آنزیم اختصاصی لنفوسیت هایB  در هایپرموتاسیون سوماتیک و نوترکیبی تعویض کلاس ژن های آنتی بادی در فولیکول های لنفوسیت B ارگان های لنفاوی محیطی می باشد. بیان نا به جای این آنزیم منجر به موتاسیون در سلول های غیر از لنفوسیت های B و حتی در باکتری Escherichia coli شده است. با این وجود، القای موتاسیون در باکتری Escherichia coli  توسط بیان آنزیم AID، نیازمند بهینه سازی شرایط مطلوب و کنترل شده می باشد. بنابراین هدف این مطالعه تولید یک پلاسمید  بیانی AID تحت کنترل پروموتر حساس به حرارت از باکتریوفاژ لامبدا می باشد. مواد و روش ها: در مرحله اول، جداسازی ژن AID از پلاسمید نوترکیب PGEMT حاوی AID انجام شد. ژن تخلیص شده در پلاسمید PTG۱۹-T در باکتری E.coli سوش Top۱۰ کلون شد و سپس در یک پلاسمید بیانی القایی با دما حاوی پروموتر چپ باکتریوفاژ لامبدا و رپرسور حساس به حرارت cI۸۵۷ منتقل و در باکتری E.coli قرار داده شد. در مرحله آخر، ژن مقاومت به تتراسایکلین جایگزین ژن مقاومت این پلاسمید نوترکیب شد. یافته ها: ژن AID در پلاسمید حاوی رپرسور حساس به حرارت cI۸۵۷ از باکتریوفاژ لامبدا انتقال یافت. صحت توالی و چارچوب خوانش توسط الکتروفورز محصولPCR، استفاده از روش های هضم آنزیمی وهمچنین تعیین توالی ژنAID، تایید شد. استنتاج: ژن AID به طور موفقیت آمیزی در پلاسمید حاوی پروموتر حساس به حرارت از باکتریوفاژ لامبدا کلون شد. این پلاسمید نوترکیب می تواند در سویه های مختلف باکتریE.coli  جهت تولید سویه های mutator استفاده شود.

کلیدواژه ها:

AID ، mutator strain ، lambda PL promoter ، AID ، سویه mutator ، پروموتر چپ فاژ لامبدا

نویسندگان

نسیم حافظی

PhD Student in Immunology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran PhD Student in Immunology, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

ابوالقاسم عجمی

Professors, Department of Immunology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran Professors, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

رضا ولدان

Assistant Professor, Department of Immunology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran Assistant Professor, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Gómez-González B, Aguilera A. Activation-induced cytidine deaminase action is strongly ...
  • Dickerson SK, Market E, Besmer E, Papavasiliou FN. AID mediates ...
  • Delker RK, Fugmann SD, Papavasiliou FN. A coming-of-age story: activation-induced ...
  • Mayorov VI, Rogozin IB, Adkison LR, Frahm C, Kunkel TA, ...
  • Rogozin IB, Pavlov YI. The cytidine deaminase AID exhibits similar ...
  • Carpenter MA, Rajagurubandara E, Wijesinghe P, Bhagwat AS. Determinants of ...
  • Petersen-Mahrt SK, Harris RS, Neuberger MS. AID mutates E. coli ...
  • Rubin-Pitel S. Chapter ۳-Directed Evolution Tools in Bioproduct and Bioprocess ...
  • Valdez-Cruz NA, Caspeta L, Pérez NO, Ramírez OT, Trujillo-Roldán MA. ...
  • Besmer E, Market E, Papavasiliou FN. The transcription elongation complex ...
  • Pham P, Bransteitter R, Petruska J, Goodman MF. Processive AID-catalysed ...
  • Chopra I, O’Neill AJ, Miller K. The role of mutators ...
  • Chao L, Cox EC. Competition between high and low mutating ...
  • Selifonova O, Valle F, Schellenberger V. Rapid evolution of novel ...
  • Muteeb G, Sen R. Random mutagenesis using a mutator strain. ...
  • Rosano GL, Ceccarelli EA. Recombinant protein expression in Escherichia coli: ...
  • Nicastro J, Sheldon K, Slavcev RA. Bacteriophage lambda display systems: ...
  • Huang CJ, Lin H, Yang X. Industrial production of recombinant ...
    • نمایش کامل مراجع