کشت و تکثیر سلول های بنیادی واقع در لیمبوس قرنیه انسانی

مقدمهسلول های اپیتلیوم قرینه به طور طبیعی از بین می روند و سلول های بنیادی ناحیه لیمبوس با تکثیر و تمایز جایگزین آن ها می گردند. در صورت نقص در این سلول ها امکان جایگزینی وجود ندارد و در بسیاری از موارد بیمار بینایی خود را از دست می دهد. یکی از جدیدترین روش های درمان نقص سلول های بنیادی لیمبال، کشت آن ها در آزمایشگاه و انتقالشان روی چشم بیمار است. بدین منظور در این مطالعه به ارتقاء کیفیت کشت آزمایشگاهی سلول های لیمبال پرداختیم. روش کارابتدا ناحیه ی لیمبوس نمونه های چشم های اهدایی جدا شدند. سپس قطعات جدا شده با روش explant بر روی پرده آمینوتیک کشت داده شدند. حضور و تکثیر سلول های بنیادی لیمبال با روش ایمونوفلورسنت وآنتی بادی علیه مارکرهای ΔNP۶۳α و ABCG۲ در روزهای دهم، چهاردهم و بیست و یکم بررسی گردید. همچنین با استفاده از روش فلوسایتومتری و آنتی بادی علیه مارکر ΔNP۶۳α درصد سلول های لیمبال در بهترین روز کشت آن ها بر اساس نتایج ایمونوفلورسنت تعیین گردید. نتایجنتایج ایمونوفلورسنت هر سه روز تایید کننده ی کشت موفق سلول های بنیادی لیمبال بودند. با توجه به نتیجه بهتر کشت در روز چهاردهم آزمون فلوسایتومتری برای کشت های روز چهاردهم انجام شد. به طور متوسط ۵.۸ درصد از سلول های کشت داده شده، سلول های بنیادی لیمبال بودند. نتیجه گیرینتایج حاکی از کشت موفق سلول های لیمبال در شرایط آزمایشگاهی بود اما به منظور کاربرد بالینی آن ها بهینه سازی بیشتر کشت مورد نیاز می باشد.