شناسایی داروهای مکمل گانودرما لوسیدوم به روش PCR با استفاده از مارکرهای نواحی فاصله ساز داخلی ریبوزومی

سابقه و هدف: قارچ گانودرما لوسیدوم(Ganoderma lucidum) از مهمترین قارجهای درمانی شناخته شده در ایران و جهان می باشد. در این مطالعه با توجه به عدم وجود دستورالعمل ثابت و مشخص برای کنترل کیفی مکمل های قارچی در کشورمان، روشی بر پایه بررسی مولکولی برای استاندارد سازی و کنترل کیفی آن ارائه گردیده است. مواد و روش ها: هشت نمونه از دو برند تجاری مکمل های قارچ لوسیدیوم از داروخانه ها تهیه گردید. آزمون PCR با استفاده از   DNA استخراج شده از کپسول ها انجام پذیرفت. سپس از محصول PCR توالی یابی صورت گرفت و نتایج حاصل از توالی یابی با Genbank  و پایگاه ژنی مورد مقایسه قرار گرفته و درخت فیلوژنی مبتنی بر ITS آنها با تمامی توالی های شناخته شده از ایران رسم گردید. یافته ها: استخراج DNA از کپسول ها برای تست PCR بهینه گردیدند و محصولات PCR در ژل آگاروز بر اساس اندازه های مورد انتظار مشاهده شد. Blast و رسم درخت فیلوژنی توالی ها مشخص کرد قارچ موجود در یکی از نمونه های تجاری با برچسب آن تطابق کامل داشته و گانودرما لوسیدیوم بود و برند دیگر این تطابق را نشان نداد و به جای گانودرما لوسیدیوم  از گانودرما رسیناسیوم (Ganoderma resinaceum)  استفاده شده بود. نتیجه گیری: با توجه به تفاوت های کمی و کیفی مقادیر ترکیبات موثر در نمونه های مکمل های قارچی مختلف موجود در بازار هنگامی که مواد تشکیل دهنده را نمی توان از نظر مورفولوژیکی یا بیوشیمیایی تایید کرد، بهترین روش موفق و مقرون به صرفه استفاده از روشهای مولکولی ژنتیکی مبتنی بر DNA و تجزیه و تحلیل فیلوژنتیک برای احراز هویت گونه های قارچی هستند.  

کلیدواژه ها:

Ganoderma lucidum ، polymerase chain reaction ، ribosomal internal transcribed spacer ، phylogenetic tree ، Iau Science. ، قارچ گانودرما لوسیدوم ، واکنش زنجیرهای پلیمراز ، نواحی فاصله ساز داخلی ریبوزومی ، درخت فیلوژنی ، Iau Science.