امکان استفاده از آنزیم EcoR۱ در طبقه بندی سویه های اکانتامبای ایزوله شده از التهاب قرنیه

امروزه التهاب قرنیه ناشی از اکانتامبا در میان افرادی که از لنزهای طبی و زینتی استفاده می کنند روبه افزایش می باشد . آلودگی لنزها معمولا " از طریق تماس آنها با آب و محلول های ضد عفونی کننده مخصوص نگهداری آنها که قدرت ضد عفونی کنندگی آ نها کاهش یافته و بطریقی با انگل آلوده شده است صورت می گیرد .اگر همراه این آلودگی باکتری هم وجود داشته باشد ، آمیب باکتری را بعنوان ماده غذایی مورد استفاده قرار داده و رشد و تکثیر می نماید . در این موارد آکانتامبا می تواند به سطح لنزها چسبیده و در موقع استفا ده از لنز ، انگل به اپی تلیوم قرنیه نفوذ کرده و سبب ایجاد یک التهاب دردناک و شدید قرنیه شود که ممکن است تشخیص آن از سایر اشکال التهاب قرنیه مشکل باشد . هدف از انجام این پژوهش که در سال ۱۹۹۴ در مرکز تحقیقات دانشگاه منچستر انجام گردید در مرحله اول معرفی روش ت شخیص آزمایشگاهی اکانتامبا در التهاب قرنیه بوده و سپس تعیین گونه های جدا شده از موارد عفونت با روش هضم DNA آمیب به کمک آنزیم EcoR ۱ از طریق نشان دادن PELPs روی پل الکتروفورز می باشد. در این بررسی بدنبال تشخیص التهاب قرنیه با نمونه برداری از قرنیه و یا محلول مخصوص نگهداری لنزها از محیط  (Proteose peptone Yeast extract Glucose) PYG برای پرورش و تکثیر آمیب جهت تهیه  سوسپانسیون لازم برای استخراج DNA آمیب استفاده شد . تروفوزوئیت ها در یک محیط کشت مایع عاری از باکتری رشد و تکثیر داده شدند و سپس هضم کاملDNA سلول بوسیله آنزیم Restriction endonuclease برای نشان دادن  (Restriction fragment length polymorphisms) RFLPs بر روی پل الکتروفورز انجام شد. این تکنیک برای مطالعه و تمایز ۲۰ مورد اکانتامبای جدا شده از بیوپسی قرنیه و یک مورد از محلول نگهدارنده لنز که از لحاظ مرفولوژی بهم شباهت داشتند مورد استفاده قرار گرفت که در آن DNA آمیب به کمک آنزیم (EcoR۱) هضم و  سپس الکتروفورز گردید. نتایج بدست آمده از الگوی الکتروفورز آنها را به هفت گروه تقسیم نمود. نتیجه نهائی اینکه شناسائی دقیق این سویه ها و مقایسه با سویه های استاندارد یا شناخته شده نیاز به پژوهش بیشتر در این زمینه دارد.