کلونینگ قطعات ژنی NS۳ و ۵’UTR از عامل اسهال ویروسی گاوها در پلاسمید لنتی ویروسیpWPI- linker B

عامل ایجاد اسهال ویروسی گاو (BVDV)‎ از جنس پستی ویروس از خانواده ی فلیوی ویریده بوده و عامل مشکلات اقتصادی، بهداشتی قابل توجهی در مزارع پرورش گاو است. این ویروس گسترش جهانی داشته و علی رغم کاربرد تدابیر کنترلی متعدد علیه آن، بیماری BVD هم چنان شایع باقی مانده است. در سال های اخیر روش های مختلفی نظیر ژن درمانی ضد ویروسی برای کنترل عفونت BVDV بسیار به کار گرفته شده است. یکی از راه های ارزیابی این گونه تدابیر، کلونینگ نواحی حفاظت شده از ویروس در وکتورهای مناسب به منظور تهیه ی رده های سلولی بیان کننده رپلیکون های تحت ژنومی این ویروس است. در پژوهش حاضر، توالی های حفاظت شده از قطعات ژنی ۵'UTR و NS۳ از سویه ی NADL از ویروس BVD پس از تکثیر با آزمون RT-PCR ، در وکتور لنتی ویروسی pWPI- linker B در فرادست ژن GFP کلون شد. صحت کلونینگ با استفاده از هضم آنزیمی و تعیین توالی مورد تایید قرار گرفت. به این ترتیب پلاسمید نوترکیب تولید شده می تواند در سیستم های بسته بندی لنتی ویروسی به عنوان وکتور حامل ترانس ژن استفاده شود.

کلیدواژه ها:

pWPI ، Linker B ، اسهال ویروسی گاو ، NS? ، کلونینگ ، ?’UTR