کلون کردن ژن جهش یافته آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس(PA) در باسیلوس سوبتیلیس
سال انتشار: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 268
فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NCMBJ-6-21_011
تاریخ نمایه سازی: 16 آذر 1400
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس پروتئینی با خاصیت اتصال به گیرنده های سطح تمام سلول های بدن انسان می باشد. در سطح سلول های سرطانی گیرنده اختصاصی فعال کننده یوروکینازی پلاسمینوژن (uPA) ایجاد می شود که در سطح سایر سلول های نرمال بدن مشاهده نمی شوند. هدف از انجام این تحقیق تغییر جایگاه اتصال موجود بر روی PA با جهش زایی مستقیم می باشد به نحوی که این پروتئین فقط بتواند به سلول های سرطانی متصل گردد.
مواد و روش ها: در طی این تحقیق پلاسمید pMNA۱ حاوی ژن PA به روش لیز قلیایی ازمیزبان خود جدا سازی شد. در ادامه با استفاده از پرایمر های فسفریله شده و استفاده از روش PCR هم پوشان جهش هدفدار بر روی ژن PA صورت پذیرفت. در ادامه قطعه حاصله بطور مستقیم بر روی ناقل PTZ۵۷R کلون و به E.coli سویه DH۵α انتقال یافت. با استفاده از آنزیم های برش دهنده KpnI و SalI ژن PA جهش یافته جدا و بر روی ناقل pWB۹۸۰ انتقال داده شد. در آخر با استفاده از روش الکتروپوریشن به B.subtilis سویه WB۶۰۰ انتقال یافت.
یافته ها: طی این تحقیق در توالی ژن PA با روش SOE PCR جهش ایجاد کرده که در پی آن کد ژنتیکی اسید آمینه ۱۹۴ تغییر کرد. جهش ایجاد شده با تعیین ترادف بازی تایید گردید.
نتیجه گیری: سرطان مشهور به بیماری غیر قابل درمان و مرگ آور است. یکی از روش های درمان سرطان استفاده از توکسین های باکتریایی است البته در صورتیکه فقط به سلول های سرطانی آسیب برساند. لذا با استفاده از پروتئین تغییر یافته PA که فقط به سلول های سرطانی متصل می گردد می توان امیدی تازه در درمان سرطان ایجاد کرد.
کلیدواژه ها:
Urokinase plasminogen activator ، SOE PCR ، immune antigen of Bacillus anthracis ، Bacillus. ، فعال کننده یوروکینازی پلاسمینوژن ، SOE PCR ، آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس .
نویسندگان
محمد ابوطالب
Department of Biology, Islamic Azad University, Damghan Branch
هاتف آجودانی فر
Department of Biology, Islamic Azad University, Damghan Branch