تاثیر جهش نقطه ای D۲۲۶N بر ساختار آنزیم اینوزین منوفسفات دهیدروژنازIMPDH۱ در مقایسه با نوع طبیعی آنزیم

آنزیم IMPDH جزء آنزیمهای حفاظت شده در پروکاریوتها و یوکاریوت ها میباشد. عملکرد این آنزیم در مسیر سنتز از نو پورین ها است. پستانداران دارای دو همولوگ از ژن IMPDH هستند که با نامهایIMPDH۱ وIMPDH۲ مشخص شده اند. همچنین ایزوفرمهای رتینال آنزیمIMPDH۱ در شبکیه چشم انسان و موش نیز شناسایی شده است. جهشهای مرتبط با بیماری رتینیت پیگمنتوزا((RP در ژن IMPDH۱ کشف و عملکردهای جدیدی برای آن نیز به اثبات رسیده است. بر اثر جهش های نقطه ایR۲۲۴P و D۲۲۶N عملکرد آنزیم IMPDH۱ در شبکیه دچار اختلال و ایجاد بیماری RP میگردد. باتوجه به توضیحات داده شده برآن شدیم تا این آنزیم را از نظر ساختاری بررسی کنیم. بنابراین پس از کلونینگ نوع طبیعی IMPDH۱ موشی، بیان و تخلیص هردو ایزوفرم ۵۱۴ و۵۴۶ و نیز کلونینگ نوع جهش یافته D۲۲۶N، بیان و تخلیص ایزوفرم۵۱۴ جهش یافته به مطالعه مقایسه ایی ویژگیهای ساختاری این آنزیم با استفاده از روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون پرداختیم. با توجه به نتایج در نوع طبیعی آنزیم حضور ATP/GTP سبب ایجاد ساختارهای اکتامری به همراه تقویت فعالیت آنزیم از واحدهای مونومری آنزیم میکند. در حالی که وجود مهارکننده مایکوفنولیک اسید ایجاد ماکرومولکولهای بشدت بزرگ فاقد فعالیت میکند. همچنین، ایزوفرم جهش یافته در مقایسه با نوع طبیعی ساختارهای بشدت بزرگی را ایجاد میکنند. وجود دنباله Cترمینال در ایزوفرم رتینال حساسیت این ایزوفرم نسبت به شرایط را بیشتر کرده تا تنظیم ساختاری دقیقتری داشته باشد. برای درک بهتر این موضوع لازم است مطالعات بیشتری روی این آنزیم انجام شود.

کلیدواژه ها:

رتینت پیگمنتوزا ، کروماتوگرافی ، ایزوفرم رتینال