سنتز سبز نانو ذره نقره با استفاده از عصاره جلبک اسپیرولینا و بررسی القا آپوپتوز و اتوفاژی در رده سلولی سرطان کولون

سنتز سبز با استفاده از عصاره های گیاهی روشی ساده و کم هزینه جهت تولید نانو ذرات نقره به شمار میرود. بعلاوه یافتن اثرات درمانی و تشخیصی جدید برای نانو ذرات نقره از زمینه های جذاب در تحقیقات سرطان محسوب میشود. یکی از راه های سنتز سبز با استفاده از عصاره جلبک ها می باشد. جلبک اسپیرولینا غنی از ترکیبات فعال زیستی می باشد و دارای خواص ضد ویروسی، ضد سرطان و تقویت سیستم ایمنی است در حالیکه اثر نامطلوبی روی سلولهای انسان ندارد. هدف از این پژوهش ساخت نانو ذره نقره با استفاده از عصاره جلبک اسپیرولینا به منظور بررسی خواص ضد سرطانی بر روی رده سلولی سرطان کلون (CaCo۲) می باشد. به منظور انجام این پروژه نانوذرات نقره با روش سبز سنتز شد و با روشهای FT-IR، TEM، SEM، DLS و XRD مورد ارزیابی قرار گرفت. خواص زیستی این نانوذرات با روش ) MTT در زمانهای ۴۸،۲۴ و ۷۲ ساعت و با غلظت های ۳۲، ۱۶، ۸، ۴ و ( ʽg/ ml ۲ و بررسی اثر آپپتوز سلولی و مهار چرخه سلولی مورد ارزیابی قرار گرفت. به منظور بررسی القا مرگ برنامه ریزی شده سلولی، از روش رنگ آمیزی Annexin V/PI استفاده شد و علاوه بر این بررسی مهار چرخه سلولی نیز با روش فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت. علاوه بر این بیان ژنهای مسئول آپپتوز BAX)و (BCL۲ و مسئول آتوفاژی Beclin۱) و (ATG۵ در فاز مولکولی و با روش Real Time PCR مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها نشان داد که نانو ذره نقره سنتز شده از گیاه جلبک اسپیرولینا در غلظت ۴ میکروگرم بر میلی لیتر منجر به کاهش پنجاه درصدی زیست پذیری سلولی می گردد.در سلول های تیمار شده افزایش بیان ژن BAX و کاهش بیان ژن BCL۲ نشان دهنده القای مرگ سلولی توسط نانو ذرات نقره می باشد. بعلاوه افزایش بیان ژنهای اتوفاژی نشان دهنده القا این نوع مرگ سلولی در سلولهای سرطان کلون می باشد. علاوه بر این نتایج فلوسایتومتری نشان دهنده %۶۸ آپپتوز در سلولهای تیمار شده با نانوذره نقره در قیاس با سلولهای تیمار شده با عصاره نشان دادند. همچنین وجود Sub-G۱ %۳۵ نشان دهنده مهار مطلوب چرخه سلولی در سلولها می باشد. با توجه به نتایج حاصله می توان گفت که نانو ذرات سنتز شده با عصاره جلبک اسپیرولینا می تواند از طریق القاء آپوپتوز و اتوفاژی اثر سیتوتوکسیک خود را بر سلول های caco۲ اعمال کند.

کلیدواژه ها:

سرطان کلون ، سنتز سبز ، نانوذرات نقره ، آپپتوز ، اتوفاژی