در همکشتی سلول های بنیادی mir۱۴۵ و کاهش بیان mir۳۰۲ افزایش بیان جنینی انسانی با سلول های بنیادی مشتق از چربی

سابقه و هدف: استفاده ازسلول های بنیادی جنینی در تحقیقات به علت توانایی بالای آنها درخود تجدیدی وتمایز به انواع سلول هادرحال افزایش است. نیازبه لایه تغذیه کننده برای حفظ حالت تمایز نیافتگی آنها از جمله محدودیت های این سلولها محسوب می-شود.بطور معمول از سلولهای فیبروبلاست جنینی برای این منظور استفاده می شود. در کاربردهای درمانی آلودگی به سلول های موشیبعنوان لایه تغذیه کننده غیرقابل قبول میباشد، لذا در سالهای اخیر از سلول های مختلفی به عنوان لایه تغذیه استفاده شده است.هدف از تحقیق حاضر مقایسه دو لایه تغذیه کننده فبروبلاست و سلول های بنیادی مشتق از چربی بلحاظ بیان ژن های پرتوانOCT۴ و Nanog در سلول های بنیادی جنینی می باشد. ضمنا تغییر بیان micro RNAهای ۳۰۲ و ۱۴۵ در دو حالت فوق مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها:ابتدا سلول های بنیادی مشتق از چربی انسانی با انزیم کلاژناز تیپ IV از بافت چربی بدست آمده توسط روش لیپوساکشن جدا شد وسپس بوسیله میتومایسین C غیرفعال شد. سلول های بنیادی جنینی تهیه شده از موسسه رویان بر روی فیدرفوق در پاساژ سه کشت داده شد. سه گروه از سلول های بنیادی جنینی مورد مطالعه شامل: ۱) کشت شده بر روی لایه فیدرفیبروبلاستی، ۲) کشت شده بر روی لایه فیدر سلول های بنیادی مشتق از چربی، ۳) کشت شده بر روی غشا میکروپور واقع بر فیدرسلولهای بنیادی مشتق از چربی. تغییر بیان ژنهای OCT۴ و Nanog و بدنبال آن miR-۱۴۵,miR-۳۰۲b با استفاده از تکنیک Real-time RCR مورد بررسی واقع گردید. یافته ها: نتایج این تخقیق نشان داد که بیان ژن های Oct۴ و Nanog و همچنین miR-۳۰۲b درسلول های بنیادی جنینی کشت شده روی لایه فیدرسلول بنیادی چربی نسبت به گروه فیبروبلاستی بالاتر بود و در مقابل بیان miR-۱۴۵ در این گروه فوق نسبت به سایر گروه ها کمتر مشاهده گردید.نتیجه گیری: نتایج ما نشان داد که هم کشتی مستقیم سلول های بنیادی جنینی با سلول بنیادی مشتق از چربی در مقایسه بافیبروبلاست بعنوان فیدر افزایش بیان ژنهای پر توانی را بدنبال دارد. بطوری که این تغییرات افزایش بیان microRNA های مربوطبه پرتوانی را نیز در پی دارد. ضمن اینکه کاهش بیان microRNA مسئول تمایز نیز قابل مشاهده است.

کلیدواژه ها:

سلول های بنیادی جنینی ، سلول های بنیادی چربی ، فیبروبلاست جنینی موش ، لایه تغذیه کننده ، سلول های بنیادی جنینی ، سلول های بنیادی چربی ، فیبروبلاست جنینی موش ، لایه تغذیهOct۴ ، Nanog ، ، microRNR۱۴۵ ، ۳۰۲Oct۴ ، Nanog ، ، microRNR۱۴۵