جداسازی و شناسایی مولکولی باسیلوس سوبتی لیس سویه H1F مقاوم به کروم از پساب یک کارخانه چرم سازی

آلودگی با فلزات سنگین یک مشکل جهانی است، میزان فلزات سنگین در هوا، آب و خاک، رو به افزایش است و در برخی موارد به حد سمی میرسد که علت آن انتشار آلودگی از منابع صنعتی به محیط زیست است. حذف فلزات سنگین نیاز به فناوری پیشرفته و پرهزینه ای دارد بنابر این پاکسازی زیستی با استفاده از میکروارگانیسم های مقاوم به فلزات سنگین می تواند راهکاری ارزان باشد. این مطالعه با هدف جداسازی و شناسایی مولکولی باکتریهای مقاوم به کروم و تعیین حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد آنها (MIC) در شرایط آزمایشگاهی انجام شد. جهت انجام این پژوهش نمونه گیری از پساب یک کارخانه چرمسازی در خوزستان انجام شد. برای جداسازی باکتریهای مقاوم به کروم از روش رقت در آگار و محیط کشت PHG II آگار حاوی کروم استفاده گردید. سپس مراحل خالص سازی باکتریها انجام گرفت و میزان حداقل غلظت ممانعت کننده رشد باکتریها برای فلز با غلظت های 7، 7/5 و 8 میلی مول بر لیتر تعیین گردید. سپس شناسایی مولکولی سویه های مقاوم به کروم از طریق تعیین توالی ژن 16S rDNAانجام شد. در این مطالعه سه سویه مقاوم به فلز کروم جداسازی و شناسایی شدند که در بین آنها Bacillus subtilis سویه H1Fبیشترین میزان مقاومت را نسبت به کروم ( MIC=6 mM) نشان داد. بر اساس آنالیز مولکولی این جدایه دارای توالی نسبتا جدیدی بود و به عنوان Bacillus subtilis سویه H1F در بانک جهانی ژن (NCBI) به ثبت رسید. با توجه به نتایج این پژوهش بهنظر میرسد که سویه جداسازی شده پس از آنتی بیوگرام و حذف ژنهای مربوط به مقاومت آنتی بیوتیکی میتواند انتخاب مناسبی برای حذف زیستی کروم از پسابهای آلوده در آینده باشد.

کلیدواژه ها:

پاک سازی زیستی ، باکتری های مقاوم به کروم ، پساب چرم سازی ، MIC ، 16S rDNA ، PCR