بررسی نقش چپرونی پروتئین Hsp70 از ماهی Rutilus frisii kutum در غیرفعال سازی حرارتی لوسیفراز در شرایط in vivo

هدف: نقش چپرونی پروتئین Hsp70 از ماهی Rutilus frisii kutum در غیرفعال سازی حرارتی لوسیفراز در سلول باکتری E. coli کوترنسفرم شده حامل ژن های لوسیفراز و چپرون مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش‫ها: انتقال هم‫زمان دو وکتور بیانی حاوی ژن های Hsp70 و لوسیفراز به سلول های باکتری E. coli انجام شد. سپس بیان سلول های کوترنسفرم شده تحت شرایط بهینه انجام پذیرفت. بعد از افزودن تتراسایکلین، نمونه های باکتری در دماهای 40، 42، 44، 46، 48 و 50 درجه سانتی‫گراد در طی زمان 60 دقیقه انکوبه شدند و در نهایت فعالیت لوسیفراز نمونه‫ها اندازه‫ گیری شد. نتایج: در دماهای 40 و 42 درجه سانتی‫گراد  با گذشت زمان 30 دقیقه، فعالیت لوسیفرازی در نمونه های کنترل تقریبا به صفر می رسد، در صورتی که در نمونه های کوترنسفرم به‫ترتیب حدود 72 درصد و 60  درصد فعالیت لوسیفرازی نسبت به نمونه های کنترل (‫قبل از تیمار حرارتی) حفظ شد و حتی پس از60 دقیقه نیز تا 36  درصد و 22 درصد فعالیت همچنان باقی ماند. همچنین در استرس دماهای 44 و46 درجه  سانتی‫گراد، اختلاف قابل ملاحظه ای بین فعالیت لوسیفرازی نمونه کوترنسفرم و کنترل در زمان های اولیه پس از اعمال استرس مشاهده شد. در صورتی که در دماهای 48 و 50 درجه  سانتی‫گراد فعالیت لوسیفرازی نمونه کوترنسفرم نسبت به نمونه کنترل حتی در زمان های اولیه استرس اندک بود. نتیجه گیری: تجمع حرارتی لوسیفراز به عنوان یک پروتئین گزارش‫گر مهم، در دماهای بالا با توجه به فعالیت چپرون  Hsp70 در سلول باکتری مهار شود که این امر می تواند در صنایع غذایی، داروسازی و تهیه ی کیت های تشخیص سرطان کاربردهای فراوانی داشته باشد.  

کلیدواژه ها:

Hsp70 ، Rutilus frisii kutum ، لوسیفراز ، in vivo ، غیرفعال سازی حرارتی