جداسازی و شناسایی باکتری های مولد موادآنتی باکتریال علیه چهار پاتوژن شایع انسان از خاک های شهرستان بیرجند

سابقه و هدف: مقاومت به آنتی بیوتیک های در حال افزایش است بنابراین جست و جو برای پیداکردن آنتی بیوتیک های جدید از منابع مختلف یک امر ضروری است. خاک منبع میکروارگانیسم های متعددی از جمله سه گروه مهم اکتینومایست ها، باسیلوس ها و سودوموناس ها است که ترکیبات ضد میکروبی فراوانی تولید می کنند. از این رو ما در این مطالعه با توجه به شرایط جغرافیایی خاص شهرستان بیرجند باکتری های مولد مواد آنتی باکتریال را از خاک مناطق مختلف شهرستان جداسازی و تولید مواد ضد میکروبی آن ها را مورد ارزیابی قرار دادیم. مواد و روش ها: جامعه مورد مطالعه در این طرح خاک های زراعی و باغی محدوده جغرافیایی شهرستان بیرجند بود. انتخاب نقاط نمونه برداری بصورت تصادفی بود و نمونه های خاک بصورت سطحی برداشت شدند. برای غربال گری اولیه اثر ضد میکروبی باکتری های جدا شده از خاک، از روش تست حساسیت خطی استفاده شد. ایزوله های دارای اثر مهارکنندگی کشت مایع شدند و هاله عدم رشد برای باکتری های پاتوژن مورد بررسی قرار گرفت. تاثیر مایع رویی فیلتر نشده و شده محیط کشت مایع که این سویه ها در آن به مدت 48 ساعت کشت شده بودند بر روی باکتری های شاخص به روش انتشار از چاهک مورد آزمایش قرار گرفت که در نهایت ایزوله هایی که دارای بیشترین اثر مهار کنندگی بودند به روش ژنوتایپینگ با استفاده از پرایمر های عمومی برای قطعه ی ژنی16Sr RNA تعیین توالی و شناسایی شدند. یافته ها: از 50 نمونه ی خاک برداشت شده از مناطق مختلف شهرستان بیرجند 246 ایزوله ی باکتریایی جداشدند که بعد از غربالگری اولیه22 نمونه شناسایی شدندکه دارای اثر مهارکنندگی بر روی باکتری های پاتوژن (استافیلوکوکوس اوریوس حساس و مقاوم به متی سیلین، سودوموناس آیروژینوزا، کلبسیلا پنومونیه و E.coli) بودند. در بین این 22 نمونه اکثر نمونه ها بر علیه استافیلوکوکوس موثر بودند. این ایزوله های باکتریایی همگی گرم مثبت و اکثرا هوازی اجباری و دارای اسپور بودند. سپس در تست حساسیت با مایع رویی فیلتر شده و نشده تعداد 10 ایزوله که دارای بیشترین اثر ضد باکتریایی بودند، انتخاب شده و تعیین هویت گردیدند. نتایج تعیین هویت مولکولی این 10 ایزوله ی برتر به دست آمده از خاک های شهرستان بیرجند نشان داد همگی از گونه باسیلوسمی باشند. نتیجه گیری: با توجه به یافته ها می توان گفت که خاک های شهرستان بیرجند دارای باسیلوس های بسیار فعال تولید کننده مواد ضد میکروبی می باشد. باکتری های پاتوژن مورد استفاده در تحقیق حاضر باکتری های بیماری زای شایع انسان اندکه پاسخ ایزوله های باکتریایی جدا شده بر روی این پاتوژن ها متفاوت بوده و این احتمال وجود دارد که این باکتری ها قادر به تولید آنتی بیوتیک های جدید باشند که برای یافتن این نتایج نیاز به مطالعات بیشتر به منظور جداسازی و تلخیص مواد آنتی باکتریال و شرایط تولید بهینه آن می باشد.

کلیدواژه ها:

خاک ، باکتری ، باسیلوس ، آنتی بیوتیک