حذف ژن پروزامین سنتتاز در باکتری بروسلا ملی تنسیس Rev1 بمنظور تولید سویه ضعیف شده
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: فصلنامه علمی پژوهشی طب انتظامی، دوره: 2، شماره: 2
- کد COI اختصاصی: JR_TEB-2-2_008
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 607
نویسندگان
دانشجوی دکتری ژنتیک مولکولی، گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
ستادیار، بیوشیمی، گروه ژنتیک، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
دانشیار، هماتولوژی، گروه هماتولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
استاد، ژنتیک مولکولی، گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران- نویسنده مسئول
چکیده
مقدمه: هدف از این مطالعه، انجا م حذف ژنی در باکتری برو سلا ملی تنسیس Rev1 بهمنظور دستیابی به یک سویه تضعیف شده، بود. بدین منظور تلاش گردید تا ژن کد کننده آنزیمپروزامین سنتتاز (per) ، یکی از ژن های درگیر در تشکیل ساختار زنجیره O از LPS دیواره باکتری، ازطریق انجام نوترکیبی هم ساخت حذف گردد.مواد و رو ش ها: نو ترکیبی هم ساخت با استفاده از وکتور خودکشی حامل کاست حذفکه شامل ترادف نوکلئوتیدی کدکننده مقاومت آنتی بیوتیکی کانامایسین (Rkan) بهمراه تراد ف هایبالادست و پایین دست ژن per در طرفین آن بود، صورت گرفت. کاست حذف با انجام واکنش هایPCR سه مرحله ای با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ساخته شده و به منظور ساخت وکتورخودکشی، درون وکتور(-) pBluescriptIISK کلون گردید. انتقال وکتور خودکشی بدرون باکتری باروش الکتروپوریشن صورت گرفت.یافته ها: نتایج حاصل، صحت ساخت کا ست حذف و وکتور خودکشی را تأیید کرد. بهدنبال انتخاب سویه جهش یافته، حذف ژن per با انجام واکن ش های PCR با استفاده از پرایمرهایاختصاصی و تعیین توالی قطعه تکثیر یافته، مورد تأیید قرار گرفت. همچنین با مقایسه محصولواکنشهای RT-PCR انجام یافته با پرایمرهای اختصاصی از سویه های والد و جهش یافته، عدم بیانآنزیم پروزامین سنتتاز مورد تأیید قرار گرفت.بحث و نتیجه گیری: سویه حاصل یک سویه جهش یافته دارای نقص در ساختار LPSخود بوده که علاوه بر کاهش خطا در تمایز ما بین حیوان واکسینه شده و حیوان آلوده در تست هایتشخیصی، می تواند با انجام تست های ایمنولوژیکی بعنوان یک سویه کاندید واکسن مورد بررسی قرار بگیرد.کلیدواژه ها
برو سلاملی تنسیس Rev1 ، پروزامین سنتتاز، حذف ژنی، وکتور خودکشیمقالات مرتبط جدید
- Evaluation of Candida auris Colonization using Clinical Skin Swabs: A Single-Center Study in Isfahan, Iran
- Support and Practice of Smoke-Free Eating Places in Sarawak, Malaysia: A Structural Path Analysis
- Rate and Causes of Claim Denials in Iranian Hospitals: A Systematic Review and Meta-analysis
- The Effect of Impulsivity on Addition and Addictive Tendencies: A Meta-analysis
- Prevalence of Nosocomial Infections During the COVID-۱۹ Pandemic: A Systematic Review and Meta-analysis
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.