طراحی روشی آسان، مستقیم و سریع فوتومتری جهت اندازه گیری فعالیت آنزیم گلوتاتیون پراکسیداز سرم انسان در مقایسه با روش کمی لومینوسانس

سال انتشار: 1393
محل انتشار: اولین کنگره ملی زیست شناسی و علوم طبیعی ایران
کد COI اختصاصی: BSCONF01_603
زبان مقاله: فارسی
تعداد مشاهده: 1416

نویسندگان

کارشناس ارشد بیوشمی ،دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات گروه بیوشیمی فارس

دکترای تخصصی بیوشیمی بالینی، استادیار مرکز پیشگیری و درمان چاقی، پژوهشکده غدد درون ریز و متابولیسم، دانشکده علوم گزشکی شهید بهشتی، تهران

نعمت الله رزمی

دکترای تخصصی بیوشیمی بالینی، استادیار دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات گروه بیوشیمی فارس

چکیده

اهمیت فعالیت آنزیم گلوتاتیون پروکسیداز به سبب عملکرد آن در سیستم آنتی اکسیدانی بدن میباشد . با توجه به فعالیت آنزیمی این پروتئین، استفاده از روش فوتومتری آنزیمی به نظر منطقی می آید. هرچند جهت سنجش مقدار آنزیم کیتهای الایزا وجود دارند اما به منظور بررسی میزان فعالیت آن مانند نمونه های خارجی، استفاده از فعالیت آنزیمی پروتئین مذکور و روش فوتومتری، با خوانش میکروپلیتی مد نظر قرار گرفت. مواد و روش ها : در این تحقیق از واکنش گلوتاتیون با پراکسید آلی به کمک گلوتاتیون پراکسیداز کمک گرفته، سپس با احیاء گلوتاتیون اکسیده شده NADP+ با قابلیت جذب 340 نانومتر ایجاد شد. بررسی دقت بر اساس درصد ضریب تغییرات درون و برون آزمونی با تکرار هشت و ده تایی، حساسیت روش با میانگین سیگنال استاندارد صفر بعلاوه دو برابر انحراف استاندارد آن در تکرار ده گانه و صحت نسبی روش با آزمون های بازیافت و توازی بررسی شدند. در نهایت نتایج بررسی 50 نمونه مشترک باروش طراحی شده و روش حساس کمی لومینوسانس مقایسه گردید. یافته ها: دقت درون آزمونی و برون آزمونی به ترتیب 5/8 % و 8/8% ، حساسیت روش 3 واحد (میکرومول در میلی لیتر در دقیقه).آزمون بازیافت در محدوده های مختلف غلظتی از 100 % تا 108 % برای گلوتاتیون پروکسیداز محاسبه گردید. همبستگی بالایی (r=0/925) بین نتایج روش حساس کمی لومینوسانس با روش طراحی شده وجود داشت. بحث و نتیجه گیری: داده ها نشان دادند که روش طراحی شده نه تنها از دقت و صحت بالایی برخوردار است بلکه حساسیت قابل مقایسه ایی نسبت به روش حساس کمی لومینوسانس دارد و خوانش میکروپلیتی نیز هم دقت و هم سرعت خوانش را افزایش می دهد.

کلیدواژه ها

گلوتاتیون پروکسیداز، فوتومتری، روش کمی لومینوسانس، خوانش میکروپلیتی

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.