کاهش بارآلودگی به اندوتوکسین (LPS) قبل از تخلیص محصولات نوترکیب بیان شده در باکتری های گرم منفی با استفاده از طراحی آزمون
- سال انتشار: 1402
- محل انتشار: دوازدهمین کنگره ملی سراسری فناوری های نوین در حوزه توسعه پایدار ایران
- کد COI اختصاصی: SENACONF12_147
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 63
نویسندگان
انستیتوپاستورایران،بخش نانوبیوتکنولوژی، تهران
انستیتوپاستورایران،بخش نانوبیوتکنولوژی، تهران
دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم وتحقیقات ، گروه زیست شناسی، تهران
دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم وتحقیقات ، گروه زیست شناسی، تهران
چکیده
در این تحقیق تلاش گردید که بعد از مرحله القاء و بیان پروتئین هدف و قبل از مرحله شکست سلولی، از روش استخراج با فنل داغ با EDTAدر جهت حذف اندوتوکسین یا همان LPS (لیپوپلی ساکارید) از دیواره باکتری اشرشیاکلی حاوی ژن بیان کننده پروتئین ضد میکروبی تترامرS۳ استفاده شد. سلول جدا شده از محیط کشت در شرایط استریل در محلول (Tris-HCl) انکوبه گردید و سپس با افزودن EDTA یون های(+Ca(۲+)/Mg(۲ که مسئول اتصال LPS (لیپوپلی ساکارید) به غشاء سلولی هستند، شلاته شدند. این فرآوری باعث سست شدن اتصال LPS بهدیواره سلولی و در نتیجه آزاد شدن LPS گردید. با سانتریفیوژ کردن نمونه، LPS به صورت محلول جدا شده و بعد از شکست سلولی، احتمالچسبندگی LPS به پروتئین و در نتیجه بارآلودگی محصول کاهش یافت.برای این منظور شرایط فرآوری سلول نوترکیب با EDTA ، شامل غلظت Tris-Hcl مدت زمان فرآوری با Tris-Hcl ، غلظت EDTA ، مدتزمان تماس با EDTA ، به کمک متدلوژی طراحی آزمونها محاسبه و بهینه سازی گردید. در نهایت، سلول نوترکیب بعد از فرآوری بهینه باEDTA ، با استفاده از بافر لیز سلولی و سونیکاسیون شکسته گردید و آلودگی اندوتوکسینی آن به طور قابل ملاحظه ایی کمتر از محصولحالت شکست معمولی بود.کلیدواژه ها
لیپوپلی ساکارید، حذف اندوتوکسین، استخراج با فنل داغ، تترامر S۳مقالات مرتبط جدید
- تاثیر شخصیت برند، تجانس و عشق به برند بر تبلیغات دهان به دهان الکترونیکی در مشتریان بانک آینده
- ارائه الگوی مفهومی برای بهبود ارتباط بین تصمیم گیری و خط مشی گذاری مدیران در بخش دولتی
- بررسی رابطه ی بین نحوه عملکرد مدیریت سرمایه در گردش و هزینه سرمایه سهام عادی شرکت های پذیرفته شده دربورس اوراق بهادار تهران
- بررسی تاثیر کیفیت زندگی کاری بر بهره وری کارکنان با نقش میانجی توانمندسازی روانشناختی در بیمارستانهای شهر سیرجان
- بررسی تاثیر کیفیت زندگی کاری بر فرسودگی شغلی با نقش میانجی توانمندسازی روانشناختی در بیمارستانهای شهر سیرجان
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.