بیان و تعیین خصوصیت آنزیم نوترکیب آلکالین سرین پروتئاز جدید
- سال انتشار: 1402
- محل انتشار: اولین همایش بین المللی زیست شناسی و علوم آزمایشگاهی
- کد COI اختصاصی: ZISTCONF01_043
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 329
نویسندگان
دانشجوی کارشناسی ارشد سلولی و مولکولی ، گروه علوم پایه ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، مازندران
دانشجوی کارشناسی ارشد سلولی و مولکولی ، گروه علوم پایه ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، مازندران
دانشجوی کارشناسی ارشد سلولی و مولکولی ، گروه علوم پایه ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، مازندران
دانشجوی کارشناسی ارشد سلولی و مولکولی ، گروه علوم پایه ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، مازندران
دانشیار گروه علوم پایه ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، مازندران
چکیده
پروتئازها یکی از مهمترین و پرکاربردترین آنزیم های پروتئولایتیک صنعتی هستند. امروزه برای تولید میزان مناسب آنزیم از روش نوترکیب استفاده می شود. در مطالعه حاضر، یک ژن جدید مربوط به آلکالین سرین پروتئاز از سویه وحشی Bacillus sp RAM۵۳ که در مطالعه پیشین جداسازی ، شناسایی و همسانه سازی شده بود در میزبان E. coli BL۲۱ بیان گردید. شرایط بیان آنزیم نوترکیب از جمله زمان مناسب کشت و القا آن و میزان القا و زمان مناسب کشت بعد از القا بهینه سازی شد. آنزیم نوترکیب از عصاره سلولی استخراج شد و به روش کروماتوگرافی تمایلی با استفاده از رزین pure Co-sepharose خالص سازی گردید و برخی از خصوصیات آنزیمی از جمله فعالیت و پایداری در برابر دما و pH های مختلف و همچنین برخی ترکیبات مهار کننده و دترجنت مورد بررسی قرار گرفتند . نتایج نشان دادند که میزان فعالیت به دست آمده از آنزیم خالص ۰.۱ Unit/ml بود. آنزیم علاوه بر فعالیت در دماهای مختلف در ۶۰ تا ۷۰ درجه سانتی گراد حدود ۵۰ % از فعالیت خود را پس از ۳ ساعت حفظ نموده است . همچنین میزان فعالیت باقی مانده آنزیم در pH های ۷، ۸ و ۹ قابل توجه بوده و پس از ۴۸ ساعت بیش از ۸۰ درصد حفظ شده بود و همچنین در pH های قلیایی بالاتر از ۱۰ نیز پایداری قابل توجهی بیش از ۵۰ درصد را نشان داد. در تیمار با SDS و پراکسید هیدروژن میزان فعالیت آنزیم تا ۱۷۴ درصد افزایش یافت . با توجه به پایداری و حفظ فعالیت در دمای بالا و pH خنثی تا قلیایی در مقایسه با آنزیم های همتای تجاری می توان آن را برای صنعت شوینده ها مناسب دانست .کلیدواژه ها
پروتئاز، آنزیم نوترکیب ، پایداری ، دما، pHمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.