کلون و بیان ژن نوترکیب هومون رشد با استفاده از برچسب تیوردوکسین
- سال انتشار: 1395
- محل انتشار: فصلنامه سلول و بافت، دوره: 7، شماره: 4
- کد COI اختصاصی: JR_JCT-7-4_007
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 414
نویسندگان
پژوهشکده ی علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
پژوهشکده ی علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
پژوهشکده ی علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
پژوهشکده ی علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
چکیده
هدف: در قرن حاضر، تولید داروهای نوترکیب افزایش یافته است. از جمله این داروها، هورمون رشد می باشد که به علت مشکلاتی که در پروسهی بیان نوع سیتوپلاسمی و پری پلاسمی این پروتئین وجود دارد، یافتن راه حلی که بتواند بیان را بهینه نماید ضروری به نظر می رسد. لذا در این تحقیق با استفاده نمودن از trx-tag بیان هورمون رشد را به صورت محلول بهینه شد که علاوه بر افزایش بیان پرتئین (حل مشکل پری پلاسمی) از تشکیل انکلوزیون بادی (مشکل سیتوپلاسمی) جلوگیری می نماید.مواد و روشها: سنتز ژن و کاست ژنی به منظور بیان هورمون رشد در سیستم بیانی pET 32a صورت گرفت. کاست ژنی شاملtrx-tag برای محلول سازی پروتئین،His tag به منظور خالص سازی و انتروکیناز در ابتدای ژن rHgh به منظور جداسازی برچسب های قبلی از این پروتئین می باشد.نتایج: بعد از کلون سازی این ژن در وکتور و بیان آن، تایید آن توسط وسترن بلات صورت گرفت. نتایج به دست آمده با استفاده از نرم افزارهای آنالیز ژل درصد بیانی حدود از کل بیان را در سویه نوترکیب نشان میدهد.نتیجه گیری: در این تحقیق، نشان داده شد که با استفاده از Trx-tag می توان پروتئین را به حالت محلول در آورد و میزان بیان را بالا برد در ادامه با انجام مراحل تخمیر و پایین دستی می توان به نتایج بهتری دست یافت.کلیدواژه ها
هورمون رشد, پروتئین محلول, برچسب تیوردوکسیناطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.