بهینه سازی روش خالص سازی پروتئین موتانت استرپتوکیناز با استفاده از تکنیک افینیتی کروماتوگرافی
- سال انتشار: 1397
- محل انتشار: شانزدهمین کنگره ملی مهندسی شیمی ایران
- کد COI اختصاصی: NICEC16_048
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 858
نویسندگان
کارشناس ارشد مهندسی شیمی - بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
دکترای تخصصی بیوتکنولوژی، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتوپاستور ایران، کیلومتر ۲۵ اتوبان تهران کرج
دکترای تخصصی بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
چکیده
تخلیص پروتئین ها همواره یکی از مهم ترین و دشوارترین مراحل تولید پروتئین های دارویی بوده است. استرپتوکیناز به عنوان رایج ترین در حال حاضر مقرون به صرفه تر دارویی فیبرینولیتیک از این قانون مستثنی نیست. در این تحقیق ابتدا کولن تولیدکننده استرپتوکیناز موتاسیون یافته (SK263cys) که تگ هسیتیدینی به آن اضافه شده در محیط کشت TY2x رشد داده شده و پس از القای بیان پروتئین، میزان تولید پروتئین توسط SDS-PAGE بررسی گردید. تخلیص پروتئین با سه راهکار متفاوت انجام شد؛ درراهکار اول از تکنیک کروماتوگرافی افینیتی یون فلزی (IMAC) استفاده شد. در راهکار دوم ابتدا با استفاده از رسوب دهی با آمونیوم سولفات پیش پالایش انجام شده و سپس با تکنیک افینیتی کروماتوگرافی خالص سازی ادامه یافت. در راهکار سوم برای تلخیص پروتئین استرپتوکیناز از روش کروماتوگرافی آبگریز استفاده شد. در تخلیص به روش افینیتی درجه خلوص 93/2 در صد و با استفاده از ستون تخلیص آب گریز درجه خلوص 90/4 به دست آمد در حالی که با روش ترکیبی پیش پایش با سولفات آمونیوم و تخلیص به روش افینیتی درجه خلوص بیشتر از 88 درصد به دست نیامد. به طور کلی نتایج حاصل از این تحقیق نشان می دهد، که روش IMAC به عنوان روش نهایی در روند تخلیص استرپتوکیناز در مقایسه با دو راهکار دیگر مناسب تر است.کلیدواژه ها
استرپتوکیناز، پروتئین نوترکیب، افینیتی کروماتوگرافی، تخلیص با ژل آبگریز، سولفات آمونیوممقالات مرتبط جدید
- ساخت و مشخصه یابی هیدروژلهای درجا تشکیل شونده بر پایه فیبروئین ابریشم
- بررسی تاثیر افزودنی های مختلف بر مورفولوژی پوشش الکترولس نیکل روی فولاد ۳۰۴
- تحلیل و بررسی الگوی انتشار گازهای خروجی از فلر واحد الفین پتروشیمی گچساران به کمک نرم افزار Phast
- بررسی تجربی پایداری شعله در یک مشعل متخلخل استوانه ای دارای پیش مخلوط کننده
- بررسی جذب گاز کربن دی اکسید توسط نانو کره های سیلیکای متخلخل عامل دار شده با آمین
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.