آنالیز کمی ژن HA ویروس آنفولانزای انسانی H1N1 با استفاده از روش PCR

  • سال انتشار: 1395
  • محل انتشار: اولین کنفرانس ملی یافته های نوین زیست شناسی
  • کد COI اختصاصی: BIOC01_051
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 900
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

لیلا کنعانی

دپارتمان سم شناسی ، دانشکده داروسازی ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرضا ، شهرضا ، ایران

الهام رجبی پور

دپارتمان بیوتکنولوژی ، دانشکده زیست شناسی ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال ، تهران ، ایران

فایقه بهزادی فر

دپارتمان بیوتکنولوژی ، دانشکده زیست شناسی ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال ، تهران ، ایران

چکیده

بیماری آنفولانزا یکی از بیماریهای کشنده در انسان و پرندگان می باشد که به چندین همه گیری منجر به مرگ و میر بالا انجامیده است . آنتی ژن نورآمین ایداز ) NA ( و آنتی ژن هماگلوتینین ) HA ( مهم ترین زوجهای آنتی ژنهای سطحی ویروس هستند ، چراکه آنها مشمول نوترکیبی و تغییرات در طی تحولات ویروس می باشند . این تحولات سبب چندین اپیدمی و پاندمی ویروس آنفولانزا تا جایی که امکان دارد ، می شود . یکی از راه های ارزیابی سرعت ویروس آنفولانزا ، آنالیز کمی ژن HA ویروس آنفولانزا بوسیله متد زمان واقعی Real Time PCR( PCR ( می باشد . در این مطالعه آنالیز کمی ژن HA ویروس آنفولانزای انسانی H1N1 توسط متد زمان واقعی PCR بهینه سازی گردید . PCR با استفاده از پرایمرهای طراحی شده برای قطعه ژن HA انجام شد . قطعه ژن HA به بردار PTG-19 قرار داده شد و شبیه سازی با استفاده از روش تعیین توالی و هضم توسط آنزیم BamH1 تایید شد . پلاسمید حاوی ژن HA در رقت یک دهم تهیه شده و PCR کمی بر اساس سایبرگرین ) SYBR Green ( برای آنها انجام شد . پلاسمید حاوی ژن HA ایجاد گردید و در توالی سنجش ژن و هضم آنزیمی HA تایید شده و توسط روش Real Time PCR بر اساس سایبرگرین در رقت های مختلف انجام شد ؛ تفاوت CT بین دو رقت ارزیابی در حدود 3.5 بود . حساسیت از روش بهینه سازی شده ، 170 عدد کپی از DNA در هر واکنش بود . با بهینه سازی تجزیه و تحلیل کمی از انکوژن HA توسط روش Real Time PCR بر اساس سایبرگرین ، شرایطی پدید آمد که امکان ارزیابی بیان ژن HA در نمونه های بالینی و بنابراین در کشتهای سلولی تحت درمان با داروهای کاندیدویروس آنفولانزا حادث گردید

کلیدواژه ها

ویروس H1N1 آنفولانزای انسانی ، آنتی ژن سحطی HA ، متد کمی PCR

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.