همسانه سازی (کلونینگ)، تخلیص و مطالعه برخی خصوصیات ایمونوپاتولوژیک بخش هیدروفیلیک (122-2) آنتی ژن Core ویروس هپاتیت C به دنبال ابراز آن در سیستم پروموتر araBAD در E.coli
- سال انتشار: 1384
- محل انتشار: چهارمین همایش ملی بیوتکنولوژی ایران
- کد COI اختصاصی: NBCI04_368
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 1876
نویسندگان
بخش هپاتیت و ایدز_ انستیتو پاستور ایران_ تهران
چکیده
عفونتهای ناشی از ویروس هپاتیت C یکی از مسائل بسیار عمده بهداشت جهانی می باشد. آنتی ژن کپسید یا Core ویروس هپاتیت c یکی از کلیدی ترین پروتئینهای این ویروس در پاتوژنز و بحثهای تشخیصی مربوط به این ویروس می باشد. بسیاری از مسائل مربوط به بیماری زائی این آنتی ژن از قبیل اتصال به RNA و DNA و فعالیتهای مربوط به تغییر مسیرهای ابراز ژن های اصلی، آپوپتوز، ترانسفورماسیون و تداخل در سیستم ایمنی در سلولهای میزبان مربوط به بخش هیدروفیل (آمینواسید 122-2) پروتئین Core ویروس هپاتیت C می باشد. از آنجا که برای فعالیتهای تحقیقی و تشخیصی به مقادیر زیادی از بخش هیدروفیلیک این پروتئین در شکل ساختمان طبیعی و Native احتیاج است در تحقیق حاضر برای نخستین بار امکان تولید انبوه و تخلیص آن در شکل طبیعی با کاربرد سیستم پروموتری araBAD و T7 تحت القاء آرابینوز، صورت گرفت. ژن مربوطه پس از تکثیر به روش PCR و کلونینگ در وکتور pIVEX2.3 و تایید سکانس و ساختار نهائی به وسیله آنالیز هضمی، در باکتری BL21-AI ترانسفورم و پس از بهینه سازی شرایط بیان، تخلیص پروتئین توسط ستون آگاروز ژل Ni-NTA صورت گرفت و بازدهی برابر 3/5 mg/L برای پروتئین تخلیص شده بدست آمد. بررسی های ایونولوژیک توسط وسترن بلات با مونوکلونال آنتی بادی های علیه HCV Core و نتایج آزمایشات الایزا در قابلیت اتصال این آنتی ژن به Fcγ انسانی نشان دهنده آن بود که پروتئین در شکل ساختمانی کاملاًً طبیعی (Native) بدست آمده است و در نتیجه امکان بکارگیری آن در کاربردهای تشخیصی و تحقیقی را به طور کامل دارا می باشد.کلیدواژه ها
هپاتیت C_ araBAD_ _آرابینوز_ پروتئین Core هپاتیت Cمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.