جداسازی و تکثیر فاژهای پلی کلونال اختصاصی ویروس تریستزای مرکبات از کتابخانه فاژی
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: هشتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران و چهارمین همایش ملی امنیت زیستی
- کد COI اختصاصی: NBCI08_0408
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 744
نویسندگان
دانشجوی دکتری بیماری شناسی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
عضو هیئت علمی بخش تحقیقات ویروس شناسی موسسه تحقیقات گیاه پزشکی کشور
عضو هیئت علمی بخش ژنومیکس پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران
عضو هیئت علمی گروه بیماری شناسی دانشکده کشاورزی دانشگاه تربیت مدرس
چکیده
ویروس تریستزا یکی از مخرب ترین و از نظر اقتصادی مهم ترین عوامل بیماری زای مرکبات در دنیا به شمار می رود.از آنجا که این ویروس در بیشتر مناطق مرکبات خیز ایران گزارش شده است، لزوم مدیریت این بیماری برای حفظ محصول اجتناب ناپذیر است. روش های جدید کنترل بیماری با استفاده ازمهندسی ژنتیک موفقیت های چشمگیری در این زمینه داشته است، ازجمله این روش ها ایجاد مقاومت با استفاده از آنتی بادی های نوترکیب می باشد. یکی ازمهم ترین موانع در استفاده از این راهکار، دسترسی به ژن های آنتی بادی اختصاصی می باشد. در این تحقیق با استفاده از بررسی کتابخانه فاژی، رسیدن به این ژن ها ممکن گردید. برای استخراج آنتی بادی های نوترکیب اختصاصی علیه ویروس تریستزادراین تحقیق ابتدا ژن کدکننده پروتئین ویروسی ازگیاهان آلوده جداسازی و همسانه سازی شد و پروتئین مورد نظردر باکتری E.coli بیان شد و بعد از خالص سازی به روش کروماتوگرافی میل ترکیبی با استفاده از تکنولوژی نمایش فاژی، فاژهای کتابخانه با استفاده از پروتئین نوترکیب به روش پنینگ(روشی جهت غربال کردن کتاب خانه فاژی موجود برای دستیابی به فاژهای حامل قطعه ژن آنتی بادی مورد نظر) غربال شدند و در مراحل متوالی تکثیر و غربالگری کتابخانه صورت گرفت. جهت تایید اختصاصیت فاژهای پلی کلونال از آزمون الیزا استفاده شد و نتایج نشان داد که فاژهای جداشده اختصاصیت بالایی در اتصال به پروتئین نوترکیب دارند و در دورهای متوالی پنینگ کتابخانه اختصاصیت فاژها افزوده شد، از این فاژها جهت تولید آنتی بادی منوکلونال می توان استفاده نمود.کلیدواژه ها
نمایش فاژی، ویروس تریستزای مرکبات، پلی کلونالاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.