کلونینگ ژن پروتئینA از باکتری استافیلوکوکوس اورئوس
- سال انتشار: 1393
- محل انتشار: اولین کنگره بین المللی و سیزدهمین کنگره ژنتیک ایران
- کد COI اختصاصی: CIGS13_1248
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 872
نویسندگان
گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده ی علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده ی علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده ی علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
چکیده
پروتئینA یکی از ترکیبات دیواره سلولی بیشتر سویههای استافیلوکوکوس اورئوس میباشد که کووالانسی به پپتیدوگلیکان دیواره سلولی متصل است. ویژگی مهم این پروتئین قابلیت اتصال آن به ایمنوگلوبولینها بخصوص قطعهFCکلاسIgGگونههای مختلف حیوانات از جمله انسان،خرگوش،خوکچه هندی و .... می باشد.این ویژگی پروتئینAکاربردهای متعددی از قبیل جداسازی آنتیبادی های منوکلونال و پلیکلونال به کمک ستون کروماتوگرافی، آزمایش الیزا و سنجش های دیگر ایمنی دارد. هدف از این مطالعه کلون کردن ژن پروتئینAجهت مصارف بعدی می باشد روشها و نتایج: از کشت باکتری استافیلوکوکوس اورئوس در محیط مایعLBسلولهای باکتری جدا شدند وDNAژنومی آنها استخراج وخالص سازی گردید. با استفاده از اطلاعات موجود در بانکهای ژنتیکی، برای تکثیر ژن کامل پروتئینAحاوی 5 دمین متصل شونده به آنتی بادیهاA-E و همچنین دمین هایX و Sپرایمر طراحی گردید. سپس با استفاده ازPCRو آنزیمDNA Pfuپلی مراز قطعه2Kbp ژن پروتئینA تکثیر و خالص سازی شد. همچنین اندازه و خلوص آن به کمک الکتروفورز ژل آگارز تایید شد. محصولPCRبا انجام واکنشDNAلیگاز و متعاقب آن ترانسفورم کردن سلولهایDH5αدر پلاسمیدpUC18کلون شد تا پلاسمیدpUC- PAحاصل گردد. درنهایت سلولهای حاوی پلاسمید نوترکیبpUC-PAانتخاب وDNAپلاسمید نوترکیب استخراج گردید. صحت کلونینگ به کمک واکنش هضم آنزیمی و توالی یابی تایید شدکلیدواژه ها
کلونینگ ، استافیلوکوکوس اورئوس، پروتئینAمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.